牛体外成熟卵母胞与性控精子体外受精的研究.pdfVIP

牛体外成熟卵母细胞与性控精子体外受精的研究 指导老师：张居农教授 研究生：马学海(动物遗传育种与繁殖) 摘要 本文研究牛卵母细胞的体外成熟培养、与性别分离精子体外受精及早期胚胎体外培养程序的优 化，目的是为建立一套完善的牛性控胚胎体外生产体系，从而为该技术走出实验室，在实践中得以 应用提供理论依据。同时为核移植、转基因等胚胎工程后技术的应用奠定基础。 试验一研究牛卵母细胞体外成熟的培养方法，以提高牛卵母细胞的体外成熟率。通过添加不同 激素、以及不同血清，比较不同浓度的激素水平，不同血清及其浓度对牛卵母细胞体外成熟的影 响。以期找出在本实验室条件下，牛卵母细胞IVM所需要添加的适宜的激素浓度，血清种类及浓 度。为进一步做IVF、IVC打下基础。结果表明，选用胞质均一致密，外围至少有3层以上卵丘细 高卵母细胞体外培养的成熟率；与添加5％血清相比，添加10％的血涛成熟效果更好，单独添加 的效果．说明在牛细胞培养液中只添加10％OCS而不使用激素是完全可行的，在相同效果的前提 下可大大降低成本。 试验二研究不同精子获能添加物、不同待予密度、不同精子获能液对性别分离精子IV