用多电极阵列系研究神经元网络的发育规律.pdfVIP

摘 要* 神经发育的研究一直是神经科学中的一个重要课题 目前在细胞层次的发育研究 成为一个热点 主要是利用膜片钳 免疫组化 荧光成像等方法研究不同因子对发育 过程中神经元形态和功能的影响 由于无损得长期记录神经元电生理活动比较困难 目前对于神经元电生理发育过程研究较少 本文利用多电极阵列系统 结合光学成像 方法 实现了培养神经元网络发育过程中形态学以及电生理实时无损检测 主要研究 结果如下 在实验室已有的基础上摸索 改进了神经元培养条件 获得了较为稳定的神经元 培养方法 研究了神经元网络的形态学发育变化 结果表明 体外培养神经元网络的 建立与神经元的组织来源 培养用液的配置和保存等细节问题关系密切 在培养过程 中存在神经元的迁移和消亡 利用MEA 系统在无损的情况下连续记录网络的自发放电 从而研究了网络的电 生理发育过程 结果表明 体外培养的神经元网络放电具有多样性 发育过程中网络 放电的频率 幅度和锋电位时间间隔 ISI 在第二周到第三周有较大的变化 第三周 到第四周相对平稳 放电频率和幅度第四周以后逐渐降低 说明体外培养的神经元网 络在第三周发育成熟 且比较稳定 四周以后逐渐消亡 利用钙波实验 FM1-43