spltmnp重组病毒的构建和spltmnpv-jp-glt;,1-2gt; iap基因的克隆.pdf

SpltMNPV重组病毒的构建和SpltMNPV-JP-Gk．2鲤幽笪塞喹 中文摘要 中文摘要 斜纹夜蛾(Spodopteralitura)是各种农作物和绿化植物的重要害虫，能够危害 109科389种寄主植物。目前，生产上对于斜纹夜蛾的防治主要侧重于化学防治， 但效果并不理想。从保持生态平衡和降低化学农药对环境污染的战略考虑，利用 litura 斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodopteramulticapsid SpltMNPV)防治农作物害虫已成为国内外生物防治的重要内容之一。但是，它也有 一定的局限性，在野外条件下，杀虫速度较慢，对高龄害虫需用量大以及宿主域 窄等缺点限制了其广泛应用。为了克服上述不足，最重要的方法之一就是应用基 因工程和分子生物学等手段，通过缺失某一基因并表达昆虫选择性毒素基因。 基因．iap基区l进行克隆与序列分析；对野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltMNPV) 动外源毒素．蝎毒素基因以及增强型绿色荧光蛋白标记基因(enchancedgreen fluorescent gene，egfp)基因；构建了新的基因工程重组病毒。 protein 主要工作成果如下： FJ384668)。采用生物信息学方法对卸基因进行了分子系统发育分析。 2、利用昆虫病毒分子生物学和基因工程理论、方法和技术对具有强烈杀虫活性 的斜纹夜蛾核型多角体病毒日本株进行基因工程改造。成功构建了8个SpltMNPV 重组转移载体，为构建和筛选重组斜纹夜蛾杆状病毒杀虫剂奠定了基础。 3、进行了基因工程重组斜纹夜蛾核型多角体病毒的尝试。使用lO个重组转 移载体与野生型SpltMNPVDNA共转染Spli细胞，通过同源重组和有限稀释法筛 一步开展斜纹夜蛾的生物防治研究打下了良好的基础。 关键词：斜纹夜蛾核型多角体病毒：重组转移载体；BmkHal；卸基因；馏加 of Construction recombinantvirus SpltMNPV andCloneof Genein iap SpltMNPV-JP—G1．2 Abstract oneofthemostserious Spodopteralitura((Lepidoptera：Noctuidae))ispest aroundthe are 389 09families world．Theyhighlypolyphagous，attackingspecieses，1 of and are agriculturalgreeningplants．Recently,chemicalpesticides crops frequently controlbuthaslittle to the usedto effect．Considingenvironmentalandto pest protect balance litura ecologicalenvironment,Spodopteramulticapsid been asacommercial tocontrolthe (SpltMNPV)hasdeveloped biopestieide crop