一株耐盐性高效物胺降解新菌的筛选、分类鉴定及应用研究.pdf

谨以此论文献给一直关怀与支持我的导师、家人 及朋友们！ 姜维 万方数据 万方数据 万方数据 摘 要 一株耐盐性高效生物胺降解新菌的筛选、 分类鉴定及应用研究 摘 要 食品尤其是发酵食品中的生物胺问题已经引起广泛关注，开发有效的生物胺 控制工艺，对食品安全和人类健康具有重要意义。微生物降解法是一种有独特优 势和应用前景的食品中生物胺控制方法，本文系统研究了一株高效生物胺降解新 菌的筛选、分类鉴定、生物胺降解特性、安全性及应用。 1、建立了检测鱼露中多种生物胺的样品前处理及丹磺酰氯柱前衍生-高效液 相色谱-荧光检测器方法，并验证了其有效性。首次测定了国内市售鱼露产品中 的生物胺含量，35 个市售鱼露产品普遍含有高浓度的多种生物胺，有 20 个的组 胺含量超过 50 mg/kg，有21 个的酪胺含量超过 100 mg/kg，有 10 个的总生物胺 含量超过 1000 mg/kg。 2 、从发酵鱼露样品中筛选到耐盐性好、能同时高效降解八种生物胺且自身 不积累生物胺的菌株 SWA25。该菌株与H.xianhensis CGMCC 1.6848T 的亲缘关 系最近，但 16S rRNA 基因相似度仅为 96.5% （97% ），DNA-DNA 杂交率仅为 30.7% （50% ），为盐单胞菌属的潜在新种；经多相分类鉴定，确定菌株 SWA25 为盐单胞菌属的新种，命名为汕头盐单胞菌 （Halomonas shantousis sp.nov. ）。 3、对 H.shantousis SWA25 降解生物胺相关性质的研究结果表明，发挥生物 胺降低作用的是分布于细胞膜上的胺氧化酶，而非物理吸附或生物积累作用；一 定条件下，H.shantousis SWA25 处理 9 h 能降解 100%的色胺、苯乙胺和酪胺， 处理 20 h 能降解 66.7%的组胺、42.9%的腐胺、52.4%的尸胺、48.0%的亚精胺和 42.0%的精胺。在初始 pH 6.0-8.0、温度 30-40°C、NaCl 浓度 0.0-3.0%或乙醇浓度 0.0-2.0%的条件下，H.shantousis SWA25 降解生物胺活性最高；在初始 pH 4.0-6.0、 温度 20-30°C 或 NaCl 浓度 3.0- 15.0%的范围内能保持较高活性；大于 5.0%的乙 醇浓度强烈抑制其活性。 4 、对 H.shantousis SWA25 进行了安全毒理学评价，急性毒性试验结果表明， 小鼠对H.shantousis SWA25 的经口最大耐受量大于 15 g/kg·bw，为无毒级；遗传 毒性试验 （Ames 试验、小鼠骨髓微核试验和小鼠精子畸形试验）结果表明， H.shantousis SWA25 没有遗传毒性；30 天喂养试验结果表明，H.shantousis SWA25 未表现出亚急性毒性。因此，H.shantousis SWA25 可以安全应用于食品领域。 i 万方数据 摘 要 5、将 H.shantousis SWA25 作为降解生物胺功能发酵剂应用于黄鲫鱼露的发 酵生产，评价其在高盐食品基质中的 降解生物胺效果。与对照组相比， H.shantousis SWA25 能降低 64.5%的组胺、59.2%的酪胺、71.0%的尸胺、63.4% 的色胺、68.2%的苯乙胺、22.0%的腐