三种豆科作物菜普通花叶病毒分离物的分子鉴定及全基因组序列测定和分析.pdfVIP

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2016-02-23 发布于贵州
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三种豆科作物菜普通花叶病毒分离物的分子鉴定及全基因组序列测定和分析.pdf

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三种豆科作物菜普通花叶病毒分离物的分子鉴定及全基因组序列测定和分析

目录中文摘要………………………………………………………………………………………．I Abstract…………………………………………………………………………………………………………………．．III 1前言……………………………………………………………………………………………………………l 1．1菜豆普通花叶病毒简介…………………………………………………………………．．1 1．1．1菜豆普通花叶病毒的发生………………………………………………………………1 1．1．2菜豆普通花叶病毒的寄主范围…………………………………………………………．1 1．1．3菜豆普通花叶病毒的传播………………………………………………………………2 1．1．4菜豆普通花叶病毒的症状表现…………………………………………………………2 1．1．5 BCMV的株系划分……………………………………………………………………．．3 1．1．6BCMV的基因组结构和组成…………………………………………………………．4 1．1．7 BCMV的分子检测……………………………………………………………………．．5 1．1．8 BCMV全基因组序列的研究…………………………………………………………．．5 1．2植物病毒的遗传变异……………………………………………………………………．．6 1．3大豆、扁豆、绿豆在我国的种植情况及主要病害……………………………………．．7 1．3．1我国大豆的种植情况及主要病害………………………………………………………7 1．3．1．1我国大豆的种植情况…………………………………………………………………7 1．3．1．2我国大豆的主要病害…………………………………………………………………8 1．3．2我国扁豆的种植情况及主要病害………………………………………………………8 1．3．2．1我国扁豆的种植情况…………………………………………………………………8 1．3．2。2我国扁豆的主要病害…………………………………………………………………．．9 1．3．3我国绿豆的种植情况及主要病害……………………………………………………．10 1．3．3．1我国绿豆的种植情况………………………………………………………………．．10 1．3．3．2我国绿豆的主要病害………………………………………………………………．．10 1 1．4本研究的目的和意义……………………………………………………………………．1 2材料与方法…………………………………………………………………………………12 2．1材料…………………………………………………………………………………………………………………．．12 2．1．1样品的采集……………………………………………………………………………．12 2．1．2菌株和载体……………………………………………………………………………．12 2．1．3生化及分子生物学试剂………………………………………………………………．12 2．1．4主要实验仪器…………………………………………………………………………．12 2．1．5实验所需试剂及配制…………………………………………………………………．13 2．1．6寡核苷酸引物的合成…………………………………………………………………．13 2．2实验方法…………………………………………………………………………………13 2．2．1植物总RNA的提取……………………………………………………………………13 2．2．2引物的设计……………………………………………………………………………．15 2．2．2．1 5 2．2．2．2 2．2．2．3 2．2．3．1反转录…………………………………………………………………………………19 2．2．3．2聚合酶链式反应(PCR)…………………………………………………………．．19 2．2。4 PCR产物的克隆………………………………………………………………………．23 2．2．4．1琼脂糖凝胶电泳……………………………………………………………………．．23 2．2．4．2 PCR产物回收……………