中国小麦花叶病全基因组序列分析及cp、crp蛋白的蛋核表达和抗血清制备.pdfVIP

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中国小麦花叶病全基因组序列分析及cp、crp蛋白的蛋核表达和抗血清制备

目录 中文摘要……………………………………………………………………………………….I Abstract...….…….…….………...….………….….………….…..……….…..……….….....….………..…….….III 1.前言…………………………………………………………………………………………….1 1.1中国小麦花叶病毒研究进展…………………………………………………………….1 1.1.1分布及危害………………………………………………………………………………1 1.1.2田间症状……………………………………………………………………………………1 1.1.3分类地位………………………………………………………………………………一2 1.1.4基因组结构……………………………………………………………………………一2 1.1.5蛋白功能…………………………………………………………………………………………………………一3 1.1.6传播介体…………………………………………………………………………………6 1.1.7侵染循环………………………………………………………………………………一6 1.1.8防治措施………………………………………………………………………………~6 1.2植物病毒侵染性克隆…………………………………………………………………….7 1.3植物病毒的遗传和进化分析…………………………………………………………….8 1.3.1病毒的变异机制…………………………………………………………一……………8 1-3-2突变……………………………………………………………………………………一8 1.3.3重组………………………………………………………………………………………………………………….9 1.3.4重排…………………………………………………………………………………………………………………9 1.3.5序列分析………………………………………………………………………………10 1.4本研究的目的与意义……………………………………………………………………1l 2.材料与方法……………………………………………………………………………….13 2.1试验材料…………………………………………………………………………………13 2.1.1植物材料………………………………………………………………………………13 2.1.2菌株、质粒……………………………………………………………………………13 2.1.3酶与试剂………………………………………………………………………………13 2.1.4寡聚核苷酸引物………………………………………………………………………13 2.1.5主要实验仪器…………………………………………………………………………13 万方数据 2.2.1 CWMV全基因组序列的测定…………………………………………………………13 2.2.2 CWMV序列分析………………………………………………………………………23 2.2.3CWMV CP与CRP蛋白的原核表达…………………………………………………25 2.2.4抗血清制备……………………………………………………………………………29 2.2.5CWMV RNA2侵染性克隆的构建……………………………………………………33 3.结果与分析………………………………………………………………………………35 3.1CWMV烟台、I艋沂分离物的全基因组序列分析……………………………………。35 3.1.1 CWMV核苷酸序列及基因组分析……………………………………………………35 3.1-3系统发育关系…………………………………………………………………………37 3.1.4重组分析………………………………………………………………………………40 3.2CWMV CP与CRP蛋白的原核表达、抗血清制备……………………………………41 3.2.1 CWMV CP基因及CRP基因克隆与测序分析………………………………………41 3.2.2CWMV 3-2.3抗血清的制备与特异性检测…………………………………………………………43 3.2.4抗血清效价测定………………………………………………………………………44 3.2.5CWMV RNA2体外转录实验…………

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