华南瓜类疫霉种多样性及其化学防治研究.pdf

广西大掌博士掌位论文 华南瓜类疫霉种群多样性及其化学防治研究 华南瓜类疫霉种群多样性及其化学防治研究 摘要 由疫霉菌引起的瓜类疫病是世界性病害，据报道，该病由多种疫霉菌引起，目前 该病己成为瓜类生产中危害最严重的病害之一：因病原菌的多样化和抗药性使得对该 病的防治极为困难。为了解近年华南地区冬瓜及黄瓜疫病病原菌的构成和病原种群的 动态变化，本文对近4年来从广西和广东两省(区)不同瓜类产区分离到的193株疫霉 菌进行系统研究，从形态学和分子生物学方面进行了鉴定，测定了部分代表菌株的生 物学特性，开展了病原菌的抗药性检测与监测、交配型及其分布调查、致病性分化及 遗传多样性的RAPD分析研究，并对冬瓜疫病的化学防治进行了初步研究。主要研究 结果如下： 1、2007,--2010年从广西、广东两省(区)9个冬瓜、黄瓜产区采集疫病病株， 经分离纯化共获得193株疫霉菌，对其中10株代表菌株的形态、培养性状、寄主 范围等生物学特性进行了研究，并对其中89株的rDNA．ITS区域的序列进行了分析。 见。孢子囊呈卵形、椭圆形到长椭圆形，无乳突，孢囊梗不脱落。孢囊梗一般不分 支，孢子囊有内层出现象。绝大多数菌株表现异宗配合特性，藏卵器球形，壁光滑， 基部多呈棍棒形，雄器穿雄生。卵孢子球形，满器，偶有不满器。最适生长温度25--, 31℃，最高生长温度高于37C。最适生长pH值范围5～7．5，但多数菌株在偏酸性 (pH5～6)条件下生长较好。病原菌能利用多种碳氮源，对孔雀石绿有一定的耐性， 人工接种能严重侵染冬瓜、黄瓜、节瓜、西瓜、甜瓜等葫芦科作物，对茄科、十字 花科、伞形科的部分植物(如马铃薯、大白菜、上海青、胡萝卜)也具较强致病力。 melonis和中 序列进行同源性比较，结果表明所有供试菌株与瓜类疫霉Phytophthora 国疫霉P 系统发育树进行分析结果表明，在自举值为99％的水平上供试10株代表菌株与瓜 类疫霉Pmelonis和中国疫霉Psinensis聚成一群，明显不同于34株其他疫霉菌， 表明供试瓜类疫病菌株应归入瓜类疫霉Pmelonis和中国疫霉Psinensis种内。结 华南瓜类疫霉种群多样性及其化学防治研究 合病原菌的形态学、生物学及rDNA．ITS序列分析，将引起华南广东、广西两省(区) 冬瓜及黄瓜疫病的病原菌鉴定为瓜类疫霉Pmelonis(异名：尸．sinensis)。 2、采用菌丝块无伤接种法，测定193株瓜类疫霉对供试寄主植物冬瓜和黄瓜 的致病力差异及其寄主嗜好性。结果表明，病原群体对寄主植物冬瓜和黄瓜的致病 力均存在明显分化现象，可分为强致病力、中等致病力及弱致病力3大类群：来自 不同地区的瓜类疫霉对寄主植物冬瓜和黄瓜的致病力明显不同，多数样区以强致病 力菌株占优势。瓜类疫霉种群中至少存在3种寄主嗜好型(A，B和C型)菌株， A型菌株对冬瓜和黄瓜均表现强致病力，与原始分离寄主无关；B型菌株仅对原始 分离寄主冬瓜表现强致病力，而对黄瓜则表现为弱或中等致病力；C型菌株仅对原 始分离寄主黄瓜表现强致病力，而对冬瓜则表现为弱或中等致病力。本研究明示了 华南瓜类疫霉致病力分化的存在。 3、对从华南地区分离到的193株瓜类疫霉进行抗药性检测，结果表明，敏感 菌株、中等抗性菌株和抗性菌株分别占测试菌株的29．0％、18．1％和52．8％；不同地 区、不同寄主分离的菌株的抗性频率和抗性水平差异较大，来源于广东的菌株抗性 频率和抗性水平一般高于来源广西的菌株，分离自黄瓜的菌株高于分离自冬瓜的菌 株。大部分样点抗性菌株占据优势群体，个别菌株的抗性指数高达4226．9。叶盘漂 浮法测定结果和菌落生长速率法相似。在含药平板上对敏感菌株进行甲霜灵抗性诱 导结果表明，从60％的敏感菌株中成功诱导出对甲霜灵抗性稳定的突变体，突变体 的抗性水平为敏感性亲本的189～407倍；9株来源于未施用过甲霜灵等苯基酰胺类 的平均值0．3200___O．16171．tg／mL确定为华南地区瓜类疫霉对甲霜灵的敏感性基线； 对两个样点的监测结果表明，瓜类疫霉抗甲霜灵菌株的频率及抗性指数有逐年增高 趋势。华南广西和广东两省(区)瓜类疫霉对甲霜灵抗性普遍发生，瓜类疫霉对甲霜 灵抗药性产生与其和药剂的接触密切相关。