噬菌体phic1att位点重组系统介导的基因倒位和删除研究.pdfVIP

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2016-02-23 发布于贵州
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噬菌体phic1att位点重组系统介导的基因倒位和删除研究

_—鼍皇曼昌墨量量皇詈曼曼曼皇曼曼曼量曼量量鼍曼量皇曼曼曼曼曼墨曼量I a，，y14墨～物一目录摘要………．………………………………………………………………………………………………………………．……………。I Abstract……………………………………．………．．…．．………．…．…．……．…．…………………．……………………………．．IlI 第一章文献综述……………………………………………………………………………………1 1．1位点重组酶系统简介………………………………………………………………………一1 一㈣J 】．1．1Cre／lox重组酶系统……………………………………………………………………3 1。1．2 FLP／FRT重组酶系统…………………………………………………………………5 I．2噬菌体phiC31／att重组酶系统……………………………………………………………．．6 1．2．1噬菌体phiC3l／att重组酶系统的重组特点………………………………………．．6 1．2．2噬菌体phiC31／art重组酶系统在植物转基因中的应用……………………………6 1．3植物花青素合成中调控基因的研究概况…………………………………………………10 1．3．1植物化青素的生物合成途径………………………………………………………10 1．3．2调节花青素基因表达的转录因子的简介…………………………………………11 1．3．3花青合成途径中调节因子的调控特点与功能……………………………………．11 第二章引言…………………………………………………………………………………………．13 2．1研究的目的与意义…………………………………………………………………………．13 3 2．2研究内容……………………………………………………………………………………．1 2．2．1表达载体的构建……………………………………………………………………．13 2．2．2原核共表达与农杆菌介导转化植物………………………………………………14 第三章材料与方法…………………………………………………………………………………15 3．1实验材料……………………………………………………………………………………15 3．1．1植物材料………………………………………………………………………………15 3，1．2菌株与质粒…………………………………………………………………………．．15 3．1．3主要生化试剂………………………………………………………………………．15 3．1．4主要溶液与培养基…………………………………………………………………15 3．2实验方法……………………………………………………………………………………17 32．1表达载体的构建……………………………………………………………………17 3．2．2质粒转化大肠杆菌…………………………………………………………………18 3．2．3原核表达载体的共转化……．………………………………………………………19 3．2．4质粒转化农杆菌……………………………………………………………………．19 3．2。5农杆菌介导法转化芥菜……………………………………………………………20 3．2．6农杆菌介导法转化烟草……………………………………………………………2l 3．2．7转基因烟草、芥菜DNA的提取…………………………………………………．．21 3．2．8转基因烟草、芥菜DNA的PCR鉴定……………………………………………22 3．2．9转基因烟草的除草荆(PPT)抗性检测…………………………………………．24 3．2．10GUS基因表达的组织化学染色分析……………………………………………．．24 3．2．11重组序