川牛膝枝枯病病鉴定及生物学特性研究.pdfVIP

摘 要 川牛膝枝枯病是近年来在四JI…I牛膝种植区普遍发生的一种新病害。本文首次系 统地研究了川牛膝枝枯病的症状、病原物种类鉴定、菌株多样性的电泳分析、生物学 特性和室内药剂筛选。研究结果如下： 1．病害的症状及病菌的种类鉴定 川牛膝枝枯病主要为害枝条和茎，也可危害叶片。枝条和茎发病初期呈现水浸状 斑点，后向上、下和环茎扩展为长约3一20mrn不规则形或长形暗褐色病斑，导致枝 上部枯死。病斑常发生于分枝处，茎部易折断，病斑表面散生或密生小黑点(分生孢 子器)。叶部发病多从边缘或尖端出现水浸状斑点，后扩大为暗褐色、近圆形大斑， 病斑边缘与健部无明显界限：病部散生黑色小点(分生孢子器)。 以传统的形态分类为基础，辅以分子生物学技术，通过对病原菌形态特征、培养 性状观察和rDNA-ITS序列分析，按照真菌分类依据，川牛膝枝枯病菌为茎点霉属的 一个新种，依据Phoma属定种的原则，将其定名为：Phoma Cyathula。病菌分生孢子 器散生或聚生，初埋生于表皮下，后突破表皮，孔口外露，直径为60～360“m，高约 50～1909m，球形至扁球形，器壁褐色，膜质；分生孢子无色，单孢，椭圆形、圆柱 2．川牛膝枝枯病菌的生物学特性研究 用二个菌株，测定了温度、pH、光照、C、N源和营养条件等对病菌生长、产孢 和孢子萌发的影响。病菌生长和产孢的温度范围为10～30℃，菌丝生长最适温度为 25℃，产孢最适温度为20℃；对碳源的利用上，单糖、双糖优于多糖；对氮源的利用 以有机氮最佳；在pH5一-11内菌丝均能生长和产孢，最适为pH5、一7；在PDA、燕麦片、 10％+PDA、20％+琼脂4种培养基上菌丝生长较快，在甘露醇琼脂培养基上产孢量最 大；二个菌株对光照均不敏感，在全黑暗条件下产孢量均为最大。 病菌分生孢子在无菌水中萌发率低，加入糖分或寄主汁液可显著提高孢子的萌发 5～8适 临界RH为93％，萌发率随RH升高而上升，100％+水滴中萌发率最高。pH 宜孢子萌发和芽管伸长。分生孢子对光照敏感，在全黑暗条件下孢子萌发率和芽管长 度均最大。病原菌菌株1、2菌丝的致死温度分别为5l℃、49℃，分生孢子的致死温 度均为57℃。 3．川牛膝枝枯病菌多样性的电泳分析 菌体可溶性蛋白、酸性磷酸酯酶及酯酶同工酶酶谱结果显示，同一地区培养性 状有差异的菌株间其谱带有一定差异，这表明种内存在着异质性。这种差异必然给利 用菌体同工酶谱和可溶性蛋白电泳图谱作为分类手段带来了复杂性。我们初步认为可 以把那些共有的酶带看作是该种的标志性酶带。 4．药剂对川牛膝枝枯病菌的毒力测定 采用药皿法和玻片萌发法对多菌灵、甲基硫菌灵、代森锰锌、百菌清、烯唑醇五 种杀菌剂进行了室内筛选，测定了它们对川牛膝枝枯病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制 作用。结果表明：多菌灵对川牛膝枝枯病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用最强；甲 基硫菌灵、烯唑醇的抑制效果较好，百菌清再次，代森锰锌抑菌效果最差。 关键词：川牛膝；川牛膝枝枯病；病原鉴定；川牛膝茎点霉；生物学特性；电泳分析； 毒力测定 on Identificationand Study Biological characters of Pathogen Yang Lianfang(Phytopathology) DirectedYeHuazhi by ofPlant (DepartmentProtection，SichuanAgricultural Abstract Diebackisanewanddestru