小麦茎尖生长点化技术研究.pdfVIP

摘要 小麦的转基因，虽然有了不少成功的报道， 但依然被学术界公认为是植物转基 因研究中比较困难的领域，其操作复杂、稳定性差、实用性差是目前小麦转基因技术 中存在的主要问题。本研究以建立易操作、不依赖组织培养的小麦转基因技术为目标， 以石4185为材料，较系统地探讨了以小麦茎尖生长点为受体的基因枪转化法和农杆 菌介导转化法，取得了如下主要研究结果： (1)初步建立了基因枪法转化小麦茎尖生长点技术体系。具体包括：掰芽法制备 To株，抗性率为5．2％。用PCR检测Tl植株，6个呈阳性。 (2)初步建立了农杆菌介导转化小麦生长点技术体系。借助此体系，利用农杆菌 植株所结的幼胚(T1)于含卡那霉素的PM培养基上进行抗性筛选，获得23个抗性 株，来源于6个To代单株，抗性率为2％。对Tl植株进行PCR检测，2个呈阳性。 (3)研制出了一种适于刺伤生长点细胞的不锈钢刷。此钢刷单丝直径小(4～8 pm)、每个刷面可形成数百个刺伤小孔。特别是8pm的钢刷刚性强、耐用性好，可 以有效地对小麦茎尖生长点造成创伤。此钢刷，不仅可用来对生长点进行微创伤，也 可用来扫除覆盖在生长点上面的幼叶，对改进农杆菌介导法和基因枪法转化生长点均 具有实用价值。 关键词：小麦；生长点；基因枪；农杆菌；转化技术 StudiesonGeneticTransformationofWheatwithshoot Meristem Apical Fu Author：Dong shuang Geneticsand Major：Crop Breeding LiuGuiru Supervisor．Professor ProfessorYanmin Zhang Professorhaibo Wang Abstract Therewere successfulaboutthe transformation on many reports genetic wheat，but stillitwasconsidereda difficultfieldsinthethis studieswere relatively aera．Systematic carriedoutonthe transformationofwheatshoot bombardmentthe genetic apex，via transformationmethods．Themainresultswereasfollows： agrobacterium—mediated 1．Atechnicalfor wheatshoot bombardmentwas systemtransforming tipsbyparticle established the of offthe