棉铃虫抗药性相p450基因侧翼序列分离与转座子插入鉴定.pdfVIP

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2016-02-23 发布于贵州
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棉铃虫抗药性相p450基因侧翼序列分离与转座子插入鉴定.pdf

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棉铃虫抗药性相p450基因侧翼序列分离与转座子插入鉴定

1．7．2连接反应…………………………………………………………………………．．20 1．7．3连接产物的转化…………………………………………………………………．．20 1．7．4 13,互补法进行重组质粒的筛选……………………………………………………21 1．7．5阳性克隆检测……………………………………………………………………．．21 1．7．5．1菌落PCR反应体系…………………………………………………………21 1．7．6测序………………………………………………………………………………．．22 1．8序列分析………………………………………………………………………………．22 2结果与分析…………………………………………………………………………………22 2．1棉铃虫抗药性相关P450基因CYP6AEl2基因组5’和37侧翼序列的分离……22 2．1．1CYP6AEl2基因组57侧翼序列的分离及分析…………………………………22 2．1．2 CYP6AEl2基因组37侧翼序列的分离及分析…………………………………27 2．2棉铃虫抗药性相关P450基因CYP9A14基因组57侧翼序列的分离及分析……．28 2．3棉铃虫抗药性相关P450基因CYP9A12基因组37侧翼序列的分离及分析……．．29 7和3 2．4棉铃虫P450基因CYP321A1基因组57侧翼序列的分离…………………．30 2．4．1 CYP321A1的直系同源基因序列…………………………………………………30 2．4．2 2．4．3 3讨论……………………………………………………………………………………………………………………35 第三章柚铃虫三种SINE转座子的鉴定和分子进化分析…………………………………………37 1材料与方法…………………………………………………………………………………38 1．1供试昆虫………………………………………………………………………………．38 1．2基因组DNA提取……………………………………………………………………一38 1．3数据库分析……………………………………………………………………………．38 1．4 HaSE3的PCR扩增……………………………………………………………………38 1．4．1引物设计与合成……………………………………………………………………38 1．4．2 PCR体系及程序……………………………………………………………………38 1．4．3 PCR产物克隆及测序………………………………………………………………39 1．5序列和分子进化分析…………………………………………………………………．39 2结果与分析…………………………………………………………………………………40 2．1棉铃虫三种新型SINEs的鉴定和分析………………………………………………40 2．1．2 HaSE2的鉴定和分析………………………………………………………………46 2．1．3 2．1．4 2．1．5棉铃虫和其它昆虫5SrRNA衍生SINE家族的鉴定和分析…………………．．55 3讨论………………………………………………………………………………………………………………………58 3．2第～个3 3．35S ：；．4LINE………．…．…．…．…．…．…．…．……．………．……．…．…．………．……．…．…．…．．…．………．……．．……．59 3．5SINE家族在棉铃虫基因组中的分布与丰度…………………………………………60 参考文献…………………………………………………………………………………………………………．62 |目C谢……………………………………………………………………………………………………………………………．．80 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录…………………………………………………………………81 扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书…………………………………………………．82 王爱娜：棉铃虫抗药性相