辣椒疫霉对双炔菌胺抗药性风险评估及抗药性生理生化机制研究.pdf

果。据我 的研究成 料。与我 有权保留 塑皇垦盔 缩印或扫 I I I Il ||IIII II I lllllllll Y1 摘要 辣椒疫病是一种毁灭性病害，常对辣椒生产造成严重的经济损失。目前生产上仍 以化学防治为主。长期单一地使用同类药剂，可能引起病原菌对药剂产生抗药性，导 杀菌剂，在国内尚未大面积应用。本研究进行了辣椒疫霉对甲霜灵和烯酰吗啉的敏感 性及对不同作用机制药剂的交互抗性、双炔酰菌胺对辣椒疫病的生物活性、辣椒疫霉 对双炔酰菌胺的敏感基线、室内抗药性风险评估和抗药性生理生化机制等方面的研 究。主要研究结果如下： 1．测定了河北省不同地区的64株辣椒疫霉对甲霜灵和烯酰吗啉的敏感性。结果 表明，甲霜灵对辣椒疫霉具有明显的抑制作用，ECso值为0．1661-27．5572 lag／mL， 最高与最低相差165．91倍，不同地区采集的菌株对甲霜灵的敏感性存在着很大差异， 对烯酰吗啉均敏感。对ECso值进行线性回归分析，发现对甲霜灵的敏感性与对上述 杀菌剂的敏感性之间的相关系数很低，不存在交互抗性。 2．采用菌丝生长速率法测定了双炔酰菌胺、烯酰吗啉、嘧菌酯和霜脲氰对U个 甲霜灵敏感菌株和3个甲霜灵抗性菌株的毒力；采用离体叶片法和小株喷雾法分别测 定了双炔酰菌胺对辣椒疫病的保护作用和治疗作用；并采用菌饼靠接法测定了其对辣 椒疫病的持效期。结果表明：双炔酰菌胺和烯酰吗啉对辣椒疫霉的抑制效果较好，嘧 菌酯次之，霜脲氰最差；离体叶片法测定双炔酰菌胺10lag／mL对辣椒疫病的保护、 治疗效果分别为86．67％、60．00％；小株喷雾法测定双炔酰菌胺100 I．tg／mL对辣椒疫 病的保护、治疗效果分别为95．25％、77．81％。用药14d后100 I．tg／mL相对防效依旧 高达65．92％。双炔酰菌胺对辣椒疫霉具有很好的抑制作用，对辣椒疫病具有很好的 防治效果，其中保护效果高于治疗效果，且持效期较长，明显的治疗效果也说明该药 剂具有一定的内吸传导性。 3．采用菌丝生长速率法测定了分别采自河北定兴、藁城和山东寿光、青州等地 的1 肛g／mL之间，最高与最低相差18．4l倍，不同菌株的敏感性频率呈连续的单峰分布， 作为对双炔酰菌胺的敏感基线。 4．采用紫外诱导+菌落角变和药剂驯化的方法分别处理10个菌株，分别获得7 1．43％。通过不同抗性水平菌株对5种药剂的敏感性测定和相关性分析发现，双炔酰 菌胺与烯酰吗啉、甲霜灵、嘧菌酯和霜脲氰之间不存在交互抗性。8个抗性突变体在 无药的CA培养基平板上继代培养1l代后，6个突变体抗药性不能稳定遗传；2个突 变体能稳定遗传，ECso值维持在很高的水平，分别为1429．5237 以上。突变体的生物学性状研究表明：与亲本菌株相比，抗性突变体在菌丝生长速率、 致病性、产孢能力、适合度指数和竞争力几个性状方面均具不同程度的差异；抗性突 2—3 2．3 变体DX 20m和DX F7的产孢量、适合度和竞争性均高于亲本菌株，有利于 抗性群体的形成。综上所述，辣椒疫霉对双炔酰菌胺存在中等抗性风险。因此，双炔 酰菌胺的连续使用有利于抗药群体的发展，为避免和延缓抗药性的产生，生产上应将 其与其它无交互抗性的杀菌剂交替使用。 5．比较辣椒疫霉对双炔酰菌胺抗性菌株及其亲本菌株的生理生化指标。结果表 明：亲本菌株和抗性菌株的菌丝生长受NaCl和葡萄糖影响较小，且NaCl和葡萄糖 不同浓度处理后的所有菌株之间渗透压均不存在显著性差异，故得知NaCl和葡萄糖 均不能为辣椒疫霉提供营养和抑制其渗透。双炔酰菌胺低浓度