运用qd-flsa法定量检测转基因玉米中的cry1ab蛋白.pdfVIP

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2016-02-23 发布于贵州
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运用qd-flsa法定量检测转基因玉米中的cry1ab蛋白.pdf

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运用qd-flsa法定量检测转基因玉米中的cry1ab蛋白

摘要 flow 目前，酶联免疫吸附法(ELISA)、试纸条技术(1ateral strip)和蛋白免疫印记法(Western blot)等能够从蛋白质水平快速、高效地检测转基因食品。本论文研究了一光度计对连接效果进行鉴定。并利用转基因玉米中杀虫剂蛋白(纯CrylAb蛋白)免疫测方法，并在检测转基因食品方面得到初步应用。具体内容如下：本实验首先从苏云金芽孢杆菌(Bacillus 分乳化后采用背部皮下免疫大白兔(3kg／只)，采用间接ELISA法进行抗体效价测定。然后通过反复试验，最终成功地将量子点标记上抗体，确定其最佳溶液配比是：2靴L 量子点母液(1mg／mL)，20／lfLEDC溶液(10mg／mL)，lO,uLNHS溶液(1．5mg／mL， Abs(羊抗兔抗体)在室温下反应4h，并采用离心过滤技术，对量子 pH7．O)和0．2mg 点标记抗体的混合物分离纯化。 of of 米MON810的线性定量范围是0．05．5％，测得LOD(1imit 基因玉米，它的灵敏度更高，并且具有高准确度，高精确度和无交叉反应的特点。结果表明QD．FLISA法能高效、快速、灵敏地对转基因玉米中的CrylAb蛋白定量检测。关键词：转基因玉米MON810；量子点；CrylAb蛋白；QD—FLISA of forDetectionof in ApplicationQD-FLISA CrylAb ModifiedMaize Abstract Protein—baseddetection ofGMOssuchas flow andWesternblotdueto ELISA，lateral approaches strip fastandsensitivewere this asthe used qualitywidelydeveloped．Instudy,thequantumdots(ODs)were fluorescencelabel withthe themixturewasdetected coupled antibody,then by goat-anti-rabbit wasobtained fluorospectrophotometer．ThepolyclonalantibodyagainstpurifiedCrylAbprotein by a NewZealandWhiterabbit．The dot-basedfluorescence-linked immunizing quantum theendotoxinmonoclonal in assay(QD-FLISA)usingCrylAb antibodypresentgenetically maizeMON810was developed．