玉米低硝酸盐响microrna及靶基因鉴定与验证.pdfVIP

摘 要 玉米是重要的粮食、饲料和工业原料作物，当前已成为我国第一大作物，在国民经济发展中 占有重要地位。氮肥是农业生产中最重要与用量最人的肥料，但我国玉米主产区氮肥同收率仅为 25．2％左右，利用效率低下，因此，提高玉米氮肥利用效率与耐低氮具有重要意义。低氮逆境F， 约为21．24nt的单链非编码RNA分子，在植物生长发育、环境因子与逆境胁迫适应与调节中重要 的调控作用。因此，开展低硝酸盐逆境诱导的miRNA转录组研究，鉴定玉米不同组织中miRNA 及靶基冈对低硝酸盐处理的响应，阐明玉米对低硝盐处理的适应性调节与生理机制，具有重要的 研究意义。本研究以玉米氮敏感自交系掖478为材料，利用植物miRNA检测芯片，鉴定低硝酸 条件下根部与叶部miRNA与其靶基冈调控网络假设。主要研究结果包括： 1．不同硝酸盐浓度水培条件下的表性鉴定研究表明硝酸盐处理会显著影响玉米幼苗生物量建成 及其在根茎部的分配。自交系掖478在0．04mM硝酸盐浓度处理下，玉米幼苗表现明显的缺氮反 应，生物量最小，根茎比是其它三种处理下的约2倍；而4mM硝酸盐浓度时，总生物量最大， 苗培养的低氮处理和对照硝酸盐水平分别为0．04mM和4M。 理时间响应特征，有关结果得到了实时荧光定量PCR实验的验证。 3．在叶中共检测到14个稳定低硝酸盐响应miRNA，有4个上调表达，其余下调表达：同时检测 对低硝酸盐既稳定响应也有瞬时响应。 响应miRNA，全部上调表达，且miRl69p，miRl69i—k在叶片和根中都存在。 5．通过生物信息学方法预测了玉米低硝酸盐响应miRNA的靶基因，定量PCR结果验证了部分 相互作用参与低硝酸盐调控。我们提出miRNAJ靶基因参与玉米低硝酸盐响应的调控网络，并依 因与胁迫诱导的活性氧清除有关；第三类miRNA靶基因编码miRNA自身合成途径关键酶。 关键词：玉米，低硝酸盐，microRNA，靶基因，芯片 Abstract Maizeisan andindustrial isthefirst and a rolein cereal，fodder important crop，which crop playkey economic in wasthemost fertilizerusedmoston national China．Nitrogen important crop development is 25％and use is efficiencyonly nitrogenefficiencylow,thereby production，butnitrogenrecycling has use ofmaizeandlow resistance meaning． improvingnitrogenefficiency nitrogen important Researchon underlow treatmentscouldreveal transcriptionalregulation nitrogen mechanismsoflow resistanceand onekindof nitrogen nitrogen RNA in an in and strand with2I一24nt single non—coding length．MiRNAsplayimportan