种子春化型芥菜jsvp与绿体春化型甘蓝boflc异源蛋白互作的研究.pdfVIP

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2016-02-23 发布于贵州
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种子春化型芥菜jsvp与绿体春化型甘蓝boflc异源蛋白互作的研究.pdf

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种子春化型芥菜jsvp与绿体春化型甘蓝boflc异源蛋白互作的研究

㈣Ⅷ删㈣㈣㈣4唧 1 22 量置蔓曼置舅舅皇_皇鼍——置量I____—舅__l量量量--’…。一皇 ———————————鎏—一Y257t一目录摘要…………………………………………………………………………………………………………………．．I ABSTRACT………………………………………………………………………………………………………V 第一章文献综述……………………………………………………………………．．1 1．1花期调控的研究进展……………………………………………………………l 1．1．1 春化途径……………………………………………………………………2 1．1．2光周期途径…………………………………………………………………3 1．1．3 自主开花途径………………………………………………………………4 1．1．4赤霉素途径…………………………………………………………………4 1．2花期调控蛋白FLC、SvP的研究进展………………………………………．．6 1．2．1 FLC花期调控机理的研究进展……………………………………………6 1．2．2 SVP花期调控机理的研究进展……………………………………………8 1．2．3 FLC与SVP相互作用的研究进展………………………………………．．9 1．3蛋白质相互作用的研究进展…………………………………………………．12 1．3．1 蛋白质相互作用概述……………………………………………………．12 1．3．2研究蛋白质相互作用的常用方法………………………………………．12 3 1．4酵母双杂交系统………………………………………………………………．1 1．4．1酵母双杂交的原理………………………………………………………．13 1．4．2酵母双杂交系统的特点…………………………………………………．14 1．4．3酵母双杂交的应用………………………………………………………．14 第二章引言…………………………………………………………………………17 第三章材料与方法…………………………………………………………………19 3．1材料……………………………………………………………………………………………………．19 3．1．1 材料……………………………………………………………………………………………19 3．1．2主要的仪器………………………………………………………………．19 9 3．1．3菌株与载体………………………………………………………………．1 3．1．4主要生化试剂和试剂盒…………………………………………………．19 3．2方法………………………………………………………………………………………………………2l 3．2．1 芥菜及甘蓝、芥菜茎尖总IⅢA的提取…………………………………21 3．2．2 cDNA第一链的合成……………………………………………………．．22 3．2．3 引物设计…………………………………………………………………．23 3．2．4BD凡C、耶阡全长基因的克隆…………………………………………24 3．2．5 BiSVP截短体的亚克隆…………………………………………………．．25 3．2．6 目的基因的序列分析……………………………………………………．26 3．2．7 FLC、SVP及SvP截短体的酵母表达载体的构建……………………26 3．2．8酵母感受态细胞的制备与转化…………………………………………．28 3．2．9重组质粒毒性及自激活检测……………………………………………．29 3．2．10二倍体酵母的融合及其蛋白互