第十一章细胞工程精要.pptVIP

植物组织培养的发展简史 ① 探索阶段（19世纪初－30年代中） 德国植物生理学家HaHerlandt首次进行了植物细胞培养实验 ② 奠基阶段（30－50年代） 1934年，White培养番茄离体根尖成功 1939年，Gautheret连续培养胡萝卜根形成层首次成功 White:烟草种间杂种的瘤组织进行组培。 Nobecourt：胡萝卜进行组培。 以上三人是植物组织培养的奠基人。 植物组织培养取样 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官。 1）外植体灭菌消毒（根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等） 2）用消毒过的器械将外植体置于培养皿上 3）切取所需的外植体 4）将外植体接种于培养容器的培养基上 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！ 外植体经过一段时间在培养基上生长后，会形成愈伤组织 植物组织培养的培养基 定义：含有一定营养成分，供组织培养植物生长的基质。 无机营养成分：C，H，O大量元素及部分微量元素 几个概念： 愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 细胞融合是指两个或两个以上的相同或不同的细胞合并形成一个细胞的过程。 细胞融合过程可以发生在体内或离体条件下，可以在自然情况下，如受精过程。 更多的是人工方法使两个不同的细胞融合，发生体细胞杂交，形成新的杂种细胞。故有人称融合细胞为杂种细胞。 细胞融合过程可分成两个阶段： ①异核体阶段(heterokaryon)：异核体是指在融合细胞内含有来自两个亲本的细胞核。异核体中细胞核尚未融合， ②杂种细胞形成：当异核体同步进入有丝分裂后，核膜崩溃，来自两个细胞核的染色体结合在一起。融合细胞内只含有一个细胞核，是由来自两个亲本细胞的基因组组合在一起所形成的。 三 动物体细胞核移植技术 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 去壁 去壁 纤维素酶果胶酶 原生质体 植物细胞 原生质体融合 离心、振动、电刺激、 聚乙二醇 再生细胞壁 杂种细胞 去分化 愈伤组织 杂种植株 激素 筛选 等量 激素 再分化 植物体细胞杂交过程示意图 植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 一、植物繁殖的新途径 1.微型繁殖 (1)微型繁殖技术：快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。 (2)特点：保持优良品种的遗传特性； 高效快速地实现种苗的大量繁殖。 植物细胞工程应用 2.作物脱毒 (1)材料:无病毒的茎尖 (2)脱毒苗:切取茎尖进行组织培养获得 3.神奇的人工种子 (1)特点：后代无形状分离； 不受气候、季节和地域限制。 (2)技术：植物组织培养。 (3)结构：人工薄膜胚状体或不定芽或顶芽或腋芽。 二、作物新品种的培育 1.单倍体育种 (1)方法：花药的离体培养 (2)优点： 后代稳定遗传，都是纯合体； 明显缩短育种年限。 2.突变体的利用 (1)产生：植物组织培养。 (2)利用：筛选对人们有利突变体，进而培育新品种。 1 种类：蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。 2 技术：植物的组织培养。 四 转基因植物培育 三 细胞产物的工厂化生产   动物细胞工程 动物细胞工程是建立在动物细胞培养、细胞融合和细胞拆合技术基础上发展起来的。随着基因工程技术、基因转移技术和干细胞工程技术的发展，动物细胞工程在理论和应用两方面获得快速发展。 一 动物细胞培养 动物细胞培养：从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 1 选材： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。 2 分散成单个细胞 在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 3 过程 细胞系(cell line) 原代培养物经首次传代成功后即为细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续