分子生物学基本操作精要.pptVIP

分子生物学基本操作 手套 原则上不论什么实验都应带手套操作 特别是 无菌操作； 与RNA有关的所有操作； 重要克隆菌的挑单克隆，扩增，保存等 与有毒试剂有关的所有操作，比如染胶时的EB；提取用的有机试剂（通风橱）； Pipett 枪头 加样-使用合适的枪与枪头 比如加含有甘油的试剂，酶等最好用clear Tips 它不会有残留； 如果甘油含量高，或特别浓稠的试剂最好用Clear, Non-Beveled Tips（或将一般枪头去尖头）； 与RNA操作有关的枪头最好为Sterilized Micro-filter Tips，或者至少为用DEPC水处理的枪头； 加样体积应为枪头最大体积的20%-100%，低于该范围的用小一号的枪头；大于该范围的可以用同样的枪头加样两次（两次体积相当，比如加210ml, 可以用200ml枪头以105ml加两次）； 加样 加用任何试剂前要将试剂混合（除饱和酚，或一些特别的有机试剂） 加样的枪头应在试剂的中间表层吸收，防止枪头外壁带用过多试剂，改变加样实际体积（除饱和酚外，一定要伸到tris饱和液下的酚中） 加样酶（冰上）时，应注意体积准确，及外壁不带，内壁吹打干净，注意用枪头从反应体系的管底吸上，反复吹打 多通道枪 混匀----所有试剂在使用前都要充分混匀; 多数分子操作在加样后、反应前都要充分混匀 水浴 提前10-30分钟调好温度;稳定后才能使用;