动物细胞培养与表达制备药用蛋白摘要.pptVIP

倒置显微镜：组成和普通显微镜 一样，只不过物镜与照明系统颠 倒，前者在载物台之下，后者在 载物台之上，用于观察培养的活 细胞，具有相差物镜。 3、动物细胞传代培养 传代培养（Passage culture/Subculturing）是指 将原代培养的细胞继续转接培养的过程，一般可传代50代左右。传代培养期间的细胞称为细胞系。 注意：每进行一次分离再培养称为传一代，即从 细胞接种培养到分离再培养期间的一段时间。在 细胞的一代中，细胞约能倍增3～6次。 传代培养方法 悬浮生长的细胞可以采用加入新鲜培养基后直接 吹打分散传代，或者采用自然沉降法加入新鲜培 养基后再吹打分散进行传代。 贴壁生长的动物细胞，原代培养细胞分裂增 殖扩展成片后需要进行细胞分离重新接种培养。 一般采用酶消化法进行传代培养。 视频：动物细胞培养技术: /v_show/id_co00XOTE5MDQzMg==.html 酶消化传代过程 1、吸出或者倒掉培养瓶内的 旧培养液。 2、加入胰蛋白酶和EDTA混合 液盖满瓶底，轻轻摇动培 养瓶。 3、2～5分钟后检查，有细胞 间隙变大、细胞质回缩现 象时添加培养液终止消化 。 4、吸出消化液，加入Hanks 液轻轻转动，洗去残留消 化液。 5、加入培养液，用吸管轻轻 吹打瓶壁，使细胞脱落制 成悬液。 6、计数，接种进行传代培养。 动物细胞的传代培养 11-5 细胞株与保存 1.