向日葵ssr分标记遗传连锁图谱的构建.pdfVIP

摘 要 油用向日葵是世界五大油料作物之一，耐盐碱、耐旱、耐瘠、适应性广，主要分 布在我国的内蒙、新疆、黑龙江等西北、华北、东北的半干旱、干旱地区。在这些地 区，由于降雨量不足或分布不均，或没有灌溉条件，使得向日葵生产常常遭受干旱胁 迫，所以抗旱节水是保证向日葵高产稳产的重要措施、也是向日葵遗传改良的主要育 种目标。但由于作物抗旱性状属复杂的数量性状，基于基因定位基础上的分子育种就 成为抗旱性遗传改良的一条高效育种方法。向日葵分子标记遗传连锁图谱的构建，是 基因定位的基础，对向日葵抗旱相关性状的基因定位、图位克隆及分子育种具有重要 意义。本文以抗旱性差异显著的两个自选系 K55 、K58 为亲本材料，获得重组自交 F4 株系，选用 SSR 分子标记初步构建一张油用向日葵的分子遗传图谱。主要研究结 果如下： （1）建立了一份 RIL 群体的材料，将抗旱性差异显著的两个自选系 K55 、K58 （K55 为弱抗性自交系、K58 为强抗性自交系）杂交获得 F1 代，然后通过单粒传的 方式连续自交获得 F4 代，F4 代群体共 194 个株系。 （2 ）建立了稳定的SSR 反应体系，对其主要因素 Mg2+浓度、dNTPs 浓度、Taq 酶量、引物浓度、退火温度等进行优化，最后获得适合油葵的反应体系。各因素的终 浓度为 Mg2+浓度 2.5mM 、dNTPs 浓度 0.2mM 、Taq 酶量 0.5U 、引物浓度 0.4μM 及退 火温度 54℃。 （3 ）从500 对向日葵 SSR 引物中筛选出 150 对亲本间具有多态性的引物，有 85 对差异显著的多态性引物在群体扩增中得到预期的结果。统计多态性产物共有 227 条，共分离分析后获得 111 个标记位点来完成图谱的构建工作。 （4 ）经χ2 检验分析有 20 个标记发生了偏分离，偏分离比率为 18.02% 。其中偏 向亲本K55 有 5 个标记，偏向杂合基因型的标记有 5 个，而偏向 K58 的标记有 10 个 占所有偏分离比例的50% 。 （5 ）选用 JoinMap4.0 进行图谱的构建工作，图谱共构建出 17 个连锁群组，包 含 78 个 SSR 标记。覆盖整个基因组长度为 680.4cM，最大图距为 52.2 cM，最小图 距为 2.3cM，平均图距为 8.72cM 。图谱中第 3 条连锁群存在 1 个偏分离热点区域， 且该偏离区域中的所有标记位点偏分离方向偏向 K58 。 关键词：向日葵；SSR 分子标记；遗传连锁图谱 Construction of SSR Molecular Marker Genetic Linkage Map in Sunflower Abstract Oil sunflower is a salinity-resistant , drought and barren resistance, wide adaptability oil crops, with high economic efficiency, which is one of the worlds top five oil crops, mainly distributed in Chinas north, northwest, northeast of the semi-arid, arid regions, such as Inner Mongolia, Xinjiang, Heilongjiang. In these areas, due to inadequate or uneven distribution of rainfall or irrigation, making the sunflower production often suffer from drought stress, so water-conservation and drought-resistant is the important measures to ensure th