柿子花发育相关mads-box基因的克隆与表达分析.pdfVIP

摘 要 植物典型的花器官发育包括形成萼片、花瓣，雄蕊、雌蕊四轮花器官，而柿子的花器官却是 单性花，大多表现为雌花型，其雄蕊退化；仅有少数授粉品种具有雄花(如禅寺丸)．这与典型 花器官发育的成花机理不尽相同．植物花器官发育过程中的大多数基因都属于MADS-box基因． 本试验以雌花型柿子‘阳丰’的花为试材，通过运用RT-PCR技术及RACE法，克隆得到了一个与 其花发育相关的MADS-box基因。并对其进行了表达分析。为进一步了解柿子花发育的分子机制、 调控柿子的开花结实提供一定的理论依据． KD，等 全长1193bp，含有747bp的开放阅读框，编码249个氨基酸的蛋白序列。分子量29 电点7．2l，是一个中性蛋白。该蛋白具有完整的植物MADS--box蛋白的结构特征，包括保守 的MADS区、半保守的K区、I区和C区．(2)NCBI上经蛋白序列相似性分析，结果发 TM29分别只有72％和70“的同源性；系统进化聚类分析表明，该基因属丁植物MIKe型 片、花瓣、子房及‘禅寺丸’的雄蕊中均表达，而在叶片中不表达．(4)Southem杂交结果 表明，柿子基因组中存在Dt^纠D盯基因，而且Dn尉n钳基因在柿子基因组中是单挎贝的． 本实验克隆得到的柿子花发育相关的MADS-box基因。包括保守的MADS区，半保守的 因家族成员．经同源性比对及系统进化树分析，将该基因预测的蛋白归类于AGL2亚族的 部位、功能略有不同。如拟南芥中SEPI／2／3基因、番茄中的TM5／29基冈等等。柿子中是否也 存在DkMADSI基因的同源基因。DkMADSI基因是否可以单独，或和它的同源基因一起行使 AGL2亚族MADS-box基因的作用，还有待于对其功能进行进一步研究。 关键词；柿子。花发育，相关基因，克隆与表达分折 ABSTRACT The flower theformation developmentoftypicalplant O曜犁岱is ofsepal，petaZ，stamens，and iscommonthattheflower is carpels．However,it organsofpersimmon femaleflowersbccaos@oftbe afew flowers male contain degraded鲥am∞s．Onlypollation flowers, themolcuarmeclmismoftheflowralformation fromthe such勰‘Zenjimaru’,which isdifferent bisexualflowers．Mostofthefloral totheMADS-hox developmentgenesbelong genes．‘Yengfeng’ arc flowerschosen笛thematerialinrids MADS-hoxis persimmon pa晦aflowering-feintedgene cloned ofRT-PCRandRACEmethods．The hasbeen byway successfully expressionanalysis to c孤bedoneunderstandthemolecularmeclmismofflowers andto completed．It