大蒜病毒病原鉴及其检测技术研究.pdfVIP

摘要 通过调查发现黑龙江省大蒜普遍受到病毒的复合侵染，侵染后的田间症状多样，主要有花叶、皱 缩、卷叶、畸形、黄化、坏死和矮化等。本试验通过生物学、电子显微镜技术、血清学及分子生物学 方法对大蒜病毒病原进行检测与鉴定研究。 通过生物学试验用大蒜病毒接种鉴别寄主，对大蒜病毒病原进行初步鉴定。明确了韭葱是LYSV 寄主，千日红是PVX很好的鉴别寄主。 布在细胞质中形成各种内含体。其中弹状和长线状病毒粒子首次在大蒜病叶中发现。 78％，且 多数为复合侵染。 依据GCLVCP区域的保守序列设计并筛选了一对引物，以带毒植物总RNA为模板，进行反转录 和PeR扩增，通过反应体系和反应程序的建立与优化，扩增得到长300bp的目的片段，并对其进行了 基酸序列同源性最高达97％。并验证了该检测体系的特异性与灵敏度。 基酸序列同源性最高达93．1％，证明成功地扩增到LYSV 关性。 依据PVXCP序列设计合成了—对引物，以带毒植物总RNA为模板，在相同的反应条件下，对 97．O‰氨基酸序列同源性最高达1000／；，证明成功地从大蒜上扩增得到PVXCP