拟南芥低氮耐性变体的筛选及其生理特性研究.pdf

摘要 化肥的施用对农业生产的突破性发展功不可没，但长期大量、单一地施用化 肥特别是化学氮肥所带来的肥料利用率降低、农产品品质下降和环境污染问题正 日益突出，已经对农业的可持续发鼹产生严重的负面影响，而现代育种策略通常 是在养分充足的条件下进行的，这也使得蕴藏在植物资源中能在低养分胁迫环境 下高效吸收和利用养分的遗传潜力未能发挥。 激活标签法(ACTIVATIONTAGGING)是新近发展起来的一种用于基因分 离和鉴定的方法。本论文实验利用激活突变使特定内源基因发生过量表达而产生 显性功能获得型突变的方法，创建大规模的拟南芥突变体库，以这些转化植株作 为突变体筛选的材料。 通过反复的比较实验，自行设计专为拟南芥水培设计的植物漂浮装置，该装 置由两部分组成：浮板和容器。装有石英砂的浮板既可满足种子的直播培养，又 可以进行幼苗的移栽培养。采用发芽、幼苗等实验确定筛选拟南芥低氮耐性突变 体的适宜浓度，其含氮量为O，18mmol／L。在该浓度下，野生型基本受到抑制而 不能表现，而突变体的优势则得到发挥。 利用上述实验确定的漂浮装置和选择压，对建好的突变体库中的种子(T2) 进行大规模、高通量的突变体筛选。培养过程中，以叶绿素SPAD值为主要筛选 指标，并且辅之于