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农药加工分析总结 分析篇 （3）化学键合固定相 化学键合固定相: 目前应用最广、性能最佳的固定相； a. 硅氧碳键型： ≡Si—O—C b. 硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si — C 稳定，耐水、耐光、耐有机溶剂，应用最广； c. 硅碳键型： ≡Si—C d. 硅氮键型： ≡Si—N （1）传质快，表面无深凹陷，比一般液体固定相传质快； （2）寿命长，化学键合，无固定液流失，耐流动相冲击；耐水、耐光、耐有机溶剂，稳定； （4）选择性好，可键合不同官能团，提高选择性； （5）有利于梯度洗脱。 化学键合固定相的特点 常用溶剂的极性顺序 煤油＜正庚烷＜正已烷＜环已烷＜CCl4＜苯＜乙醚＜CHCl3CH2Cl2＜二氧六烷＜四氢呋喃＜丙酮＜乙酸乙酯＜乙腈＜甲醇＜水 第一节 概 述 电泳——在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速率不同，可实现分离。 差速运动过程 一、概述 1937年，Tiselius(瑞典)将蛋白质混合液放在两段缓冲溶液之间，两端施以电压进行自由溶液电泳，第一次将人血清提取的蛋白质混合液分离出白蛋白和α、β、γ球蛋白； 发现样品的迁移速度和方向由其电荷和淌度决定； 第一次的自由溶液电泳；第一台电泳仪； 1948年，获诺贝尔化学奖 二.经典电泳分析 利用电泳现象对某些化学或生物物质进行分离分析的方法和技术叫电泳法或电泳技术。 按形状分类：U型管电泳、柱状电泳、板电泳； 按载体分类：滤纸电泳、琼脂电泳、聚丙烯酰胺电泳、自由电泳； 传统电泳分析：操作烦琐，低电场强度下进行电泳，分离效率低，定量困难，无法与其他分析相比。 1981年，Jorgenson和Luckas，在75μm内径石英毛细管内用高电压进行分离，并阐述了有关理论，创立了现代毛细管电泳技术。柱效高达40万/m，促进电泳技术发生了根本变革，迅速发展成为可与GC、HPLC相媲美的崭新的分离分析技术——高效毛细管电泳。 三.高效毛细管电泳分析 高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进： 一是采用了10～200μm 内径的石英毛细管, 二是采用了高达数千伏的电压。 毛细管的采用使产生的热量能够较快散发，大大减小了温度效应，使电场电压可以很高。 电压升高，电场推动力大，又可进一步使柱径变小，柱长增加。 高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱，理论塔板数高达几十万块/米，特殊柱子可以达到数百万。 经典电泳技术和现代微柱分离技术相结合的产物 高效毛细管电泳的特点 1.高灵敏度 紫外检测器的检测限可达1×10－13 ~1×10－15 mol/L。 2.分析速度快、分离效率高 分离柱效：105～107/m理论塔板数。 3.取样量少 一般只需几个纳升的进样量。 4.使用成本低，只需少量（数毫升）的流动相和价格相对低廉的毛细管 5.应用范围极广 在以生物工程为代表的生命科学各领域中对多肽、蛋白质（包括酶、抗体），核酸、DNA的分离中得到了广泛的应用。其他如环境分析和农药检测等应用领域，目前也得到了迅速的发展。 一、电泳淌度 电泳是指带电离子在电场中的定向移动，不同离子具有不同的迁移速度，迁移速度与哪些因素有关？ 当带电离子以速度ν 在电场中移动时，受到大小相等、方向相反的电场推动力和平动摩擦阻力的作用。 电场力：Fe = q?E 阻 力：F d= f?ν 故： qE = fν q—离子所带的有效电荷； E —电场强度； ν—离子在电场中的迁移速度； f —平动摩擦系数 ( 对于球形离子： f =6πηr；r—离子的表观液态动力学半径；η —介质的粘度； ) 所以，迁移速度： （球形离子） 物质离子在电场中差速迁移是电泳分离的基础。 淌度μep ：单位电场强度下的平均电泳速度。 淌度μep 表示物质电泳特性的参数 1.电渗流现象 当固体与液体接触时，固体表面由于某种原因带一种电荷，则因静电引力使其周围液体带有相反电荷，在液-固界面形成双电层，二者之间存在电位差。 当液体两端施加电压时，就会发生液体相对于固体表面的移动，这种液体相对于固体表面的移动的现象叫电渗现象。 电渗现象中整体移动着的液体叫电渗流（electroosmotic flow ，简称EOF）。 二、电渗现象与电渗流 HPCE中电渗流的方向 电渗流的方向取决于毛细管内表面电荷