最新第五章原核生物基因表达调控.ppt

第五章 原核基因表达调控模式 第一节 原核生物基因表达调控的概述 基因调控的指挥系统： 一、原核基因调控机制的类型与特点 乳糖操纵子控制模型的主要内容： 2、前导区：在 trp mRNA 5’ 端 trpE 基因的起始密码子前有一个长162 bp 的 mRNA片段，被称为前导区。 前导肽：由前导序列指导合成的含有14个氨基酸残基的肽称为前导肽。 前导序列结构特点：第10和11位两个密码子为色氨酸密码子。 大肠肝菌中共有5个基因参与色氨酸生物合成，构成色氨酸操纵子。其中trp G-D，trp C-F为融合基因，翻译出的多肽具有双重功能。 有两个启动子，一个位于操纵子5’，一个位于trp G-D编码区。 大肠肝菌色氨酸操纵子受到由色氨酸激活的负阻遏蛋白的调节作用。一旦转录越过前导区，又会受弱化子的调控，感受无负载的tRNATrp的变化。使转录机器在前导区附近停止或继续结构基因的转录。 （1）当葡萄糖水平较高、阿拉伯糖水平较低时，C蛋白与操纵区O2及araI诱导因子结合区上半区结合，形成DNA回转结构，araBAD 基因不表达； （2）当体系中有阿拉伯糖、无葡萄糖时，Ara C 与阿拉伯糖相结合，改变构象成为激活蛋白， Ara C 同源体分别与araO1和araI区结合。RNA聚合酶在Ara C 蛋白和CRP- cAMP的作用下，起始BAD 基因表达。 第五节 转录水平上的其它调控方式 一、σ因子的调节作用 不同σ因子的选择；σ因子本身活性的调节； 三、转录调控因子的作用 转录调控因子：指与基因的启动子区结合，对基因的转录起激活或抑制作用的DNA结合蛋白称为转录调控因子。 第七节 转录后调控 一、翻译起始的调控 （1）起始密码子AUG，GUG，UUG，AUU，不常见起始密码子翻译起始效率较低； （2）SD序列的结构及其与起始密码子AUG之间的距离，SD序列与AUG之间的距离一般为4～10个核苷酸为佳，9个核苷酸最佳。 （3） mRNA 的二级结构 30S亚基与mRNA结合，要求mRNA 5，端有一定的空间结构，核苷酸序列的变化会改变mRNA的二级结构，影响核糖体与mRNA的结合，从而造成蛋白质合成效率的差异。 二、mRNA稳定性对转录水平的影响 细胞内无用的mRNA均被核酸酶水解。大肠肝菌CsrAB调节系统。 三、调节蛋白的调控作用 调节蛋白的表达本身也受到调控。 四、反义RNA的调节作用 细菌细胞中一些非编码的小RNA，与mRNA中特定序列配对，改变所配对mRNA分子的构象，导致翻译过程的开启或关闭。 八、魔斑核苷酸水平对翻译的影响 细菌细胞生长过程中既要合成蛋白质，又要合成RNA。 严紧控制型（基因型rel+)：在缺少任何一种氨基酸的培养基上生长时，不但蛋白质的合成速度下降，RNA合成速度也下降。 松散控制型（基因型rel-)：当氨基酸供应不足时，蛋白质合成虽然停止了，但RNA的合成速度却没有下降。 除上述生理现象不同之外，严紧控制型（基因型rel+)能合成鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp), 松散控制型（基因型rel-)则不能合成鸟苷酸。鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp）是在色谱上检出的斑点，称为魔斑。 trp 缺乏 tRNAtrp也少 核糖体通过两个trp 密码子的速度慢，占据前导序列的trp 1区 2区与3区配对，不能形成终止子结构 结构基因转录 4、转录的弱化作用 trp 浓度高 前导肽中trp 合成速度快 前导肽一直合成至其末端 核糖体占据1区和2区 3区与4区配对，形成终止子结构，使转录终止 弱化子对转录调控的关键 空间结构，10th and 11th codons encode trp residues (rare AA) 时间，核糖体停顿在2个Trp 密码子上时，产生延迟， 此时4区未转录出来 R P O leading seq. E D C B A trp + 为什么需要阻遏体系？ 当大量Trp 存在时，阻遏系统起作用。阻遏物与之结合，阻止先导mRNA合成。 经济 Negative—repressible operon 可以被最终合成产物所阻遏 四、 阻遏作用与弱化作用的协调 R P O leading seq. E D C B