核盘菌蛋白激发sscut的基因克隆、原核表达及诱导植物的多重防卫反应.pdfVIP

万方数据 摘 要 sclerotiorum(Lib．)de 核盘菌(Sclerotinia Bary)引起的油菜菌核病是油菜 上的一种重要病害。目前对于该病的防治主要采取以种植抗病品种为基础、改进 栽培管理、适时化学防治的综合治理策略。由于生产上缺乏高抗品种，农业防治 费时费工且收效甚微，化学防治又易导致环境污染、农药残留及抗药性。因此， 需要发展天然且环境友好型的制剂对油菜菌核病进行防治。激发子可替代化合 物，诱发植物的抗病性，从而阻止或限制病害的发生和扩展。 本研究根据核盘菌的全基因组数据信息，通过基因芯片信息筛选出可能诱导 植物产生非寄主抗性的角质酶基因。在实验中，对核盘菌编码角质酶的SsCut基 AccessionNo．XM 因(GenBank 001590986．1)进行了克隆，该基因片段大小为 609 kDa含有202个氨基酸的多肽，SsCut异源表达产物 bp，编码分子量为20．4 (His．SsCut)能够引起烟草叶片类似过敏性坏死反应(Hypersensitive response， HR)的坏死斑，同时还能引起拟南芥(Arabidopsis)、大_豆_(Glycinemax)、油菜 sativa)、大麦(Zeamays)和小麦(Triticum (Brassicanapus)、水稻(Oryza aestivum) 等其他双子叶和单子叶植物叶片的坏死反应。此外，激发子His．SsCut处理后与 ammonia 植物抗病相关的过氧化氢、苯丙氨酸解氨酶(Phenylalaninelyase，PAL)， 过氧化物酶(Peroxidase，POD)和多酚氧化酶(Polyphenoloxidase，PPO)也有显 著的变化。激发子His．SsCut能明显提高植株的抗性，显著抑制大豆疫霉 sclerotiorum)在寄主 (Phytophthorasojae)、烟草疫霉僻nicotianae)和核盘菌(S 上的病斑扩展。实时荧光定量PCR显示，激发子能够调节与抗病相关基因和信 号转导相关基因的表达。本研究证明激发子His．SsCut能够触发植物的防卫反应， 并有助于阐明它与下游信号诱导的防卫反应的相关性。 关键词：角质酶；激发子；过敏反应；植物防卫；核盘菌 万方数据 Abstract Stemrotcaused bySc胞rotiniasclerotiorumISan diseaseonoilseed important can resistant the of rape．Atpresent，wegrow varieties，strengthenmanagement usechemical treatmentfor cultivation，and the andcontrolofthe fungicide prevention disease．But controlCancontributetothesustainable now,biological