实验七八酵母菌形态与大小测定要点.pptVIP

实验七 酵母菌的形态观察及 死活细胞的鉴别、细胞活力测定 实验目的 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式 学习区分酵母菌死活细胞的实验方法 掌握酵母菌的一般形态及其与细菌的区别 实验原理 酵母菌：是单细胞真核微生物，大小通常比常见细菌大几倍甚至几十倍 繁殖方式：芽殖、裂殖、无性孢子繁殖、有性孢子繁殖 美蓝氧化型呈蓝色，还原型为无色。 活的酵母菌细胞具有新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。 实验材料 菌种：酿酒酵母 溶液或试剂：0.05%和0.1%美蓝 仪器及其他用具：显微镜、载玻片、盖玻片等 实验步骤 滴加1％美蓝染液，按无菌操作挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀 盖好盖玻片 3min后镜检，由低倍镜到高倍镜，并根据颜色区别死活细胞 30min后再次观察 0.05%美蓝染液重复上述操作 实验结果 设计一个表格，内容：不同浓度、不同时间下酵母菌的活细胞数和死亡细胞数。 绘制一张图，该图可明确区分出活细胞和死细胞，标明美兰的浓度、作用时间、放大倍数， 分析讨论 相同浓度不同时间进行活细胞和死细胞计数有无差别，可能原因是什么？ 不同浓度相同时间进行活细胞和死细胞计数有无差别，可能原因是什么？ 一、目的要求 1、学习并掌握用测微尺测定微生物 大小的方法。 2、了解目镜测微尺和镜台测微尺的原理 3、增强对微生物细胞大小的感性认识。 二、实验器材及用品 1、菌种 酵母菌 2、仪器或其它用具 目镜测微尺，镜台测微尺，显微镜。 三、基本原理 微生物细胞大小，是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小，只能在显微镜下测量。用来测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。 镜台测微尺 镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片。 一般将1cm等分为100格，每格长度等于0．01cm（即100μm）。是专用于校正目镜测微尺每格长度的。 目镜测微尺 目镜测微尺是一块可放在接目镜内的隔板上的圆形小玻片，其中央刻有精确的刻度，有等分50小格或100小格两种，每5小格间有一长线相隔。 由于所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也就不同，因此，目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大小，在使用前必须用镜台测微尺进行校正，以求得在一定放大倍数的接目镜和接物镜下该目镜测微尺每小格的相对值，然后才可用来测量微生物的大小。 校对 四、操作步骤 1、装目镜测微尺 2、校正目镜测微尺 （1）放镜台测微尺 将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。 （2）先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰的看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占格数。用同样的方法换成高倍镜和油镜进行校正，分别测出在高倍镜和油镜下，两重合线之间两尺分别所占格数。 低倍镜下-------倍目镜测微尺每格长度为---------- 高倍镜下-------倍目镜测微尺每格长度为---------- 油镜下----------倍目镜测微尺每格长度为---------- 目镜测微尺标定记录 3、菌体大小测定 先用低倍镜和高倍镜找到标本后，换油镜测定酵母菌的直径。 测定时，通过转动目镜测微尺和移动载玻片，测出细菌直径或宽和长所占目镜测微尺的格数。 最后将所测得的格数乘以目镜测微尺（用油镜时）每格所代表的长度，即为该菌的实际大小。 注意事项 1、镜台测微尺的玻片很薄，在标定油镜时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头； 2、标定目镜测微尺时，一定要准确对正目镜测微尺与镜台测微尺的重合线。 五、实验报告 1、不同放大倍数下，目镜测微尺标定的结果。 2、酵母菌实际测量的结果。 3、结论：本实验所用酵母菌种的平均大小。 4、思考题： (1)当接目镜不变，目镜测微尺也不变，只改变接物镜，目镜测微尺每格所量的镜台上物体的实际长度是否相同？为什么？ (2)为什么更换不同放大倍数的目镜和物镜时必须重新用镜台测微尺对目镜测微尺进行标定? (3)测量酵母菌的大小。 * 实验八 微生物大小的测定 显微测微尺 3.计下两吻合刻度间，目镜测微尺与物镜测微尺的格数。按下列公式算出目镜测微尺每小格所代表长度。 目镜测微尺每格长度（微米） 两吻合刻度间物镜测微尺格数×10μm = 两吻和刻度间目镜测微尺格数 例如：目镜测微尺的5格等于物镜测微尺的2格，则