实验显微镜下的生命世界基础生物学实验(安徽大学研究生复试用生物生命科学)要点.docVIP

实验一 显微镜下的生命世界 一、实验目的 1．了解普通光学显微镜的构造和各部分的性能，学习并掌握正确的使用方法及维护方法。 2．了解真核细胞的各种形态，及形态与机能的关系，理解细胞是生命体结构与生命活动的基本单位。 3．了解真核细胞与原核细胞，动物细胞与植物细胞结构的异同点。 4．在显微镜下观察水中的各种微小生物，认识常见的细菌和真菌，进一步认识生命的多样性。 5．学习临时装片方法、某些细胞器的活体染色方法和细菌的一般染色方法。 6．了解生物绘图的意义和方法，初步学习生物绘图技术 二、实验原理 生命的存在具有多层次性。从宏观角度，在个体水平上，千姿万态的动、植物强烈表现出的生命多样性，使整个大自然显得生机盎然、绚丽多彩。然而，随着显微镜的发明和显微技术的发展，当人们进入生命的显微世界后，不仅看到了肉眼所不能观察到的形形色色单细胞生物和低等多细胞生物，而且越来越深刻地认识到所有宏观生物都是多细胞生物，细胞是除病毒以外所有生命体结构与生命活动的基本单位，同时，细胞自身又是多层次的复杂结构体系。 生物细胞可分为原核细胞和真核细胞两大类。原核细胞由细胞膜、细胞质和核物质等部分组成，不具有典型的细胞核结构及多种细胞器，如细菌细胞。真核细胞由原核细胞进化而来，其内部结构与机能更复杂和多层次化。在结构上，真核细胞突出表现为以膜系统的分化为基础，形成了有膜包围的典型细胞核和结构与功能更专一的多种细胞器，如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、叶绿体及液泡等。并且，构成真核生物的真核细胞种类繁多，形态各异，其形态的多样性又与机能密切联系。 在显微镜下观察生命世界，使人们进一步认识到生命的多样性、层次性和整体性，进一步认识细胞的结构，以及形态结构与机能的关系。 细胞内的结构在自然状态下近于无色，一般要经过染色后方可在普通光学显微镜下显示得较清楚。不同的细胞组分对各种染料的亲和力不同。两者间亲和力强，染色就深，否则，染色就浅或无，这样便能形成足够的反差以区分细胞组分。一般生物染料不能穿透细胞膜，只有用化学试剂或热固定细胞，破坏细胞膜结构后，染料才能进入细胞内部发挥其染色作用。有些染色剂对细胞无毒或毒性很小，并能进入活细胞内染色，显示活细胞的某些结构，称活体染色，活体染色分体内活染和离体活组织染色两种。体内活染是使染料进入生物体内进行染色，离体活组织染色是对离体但仍保持生活状态的活细胞进行染色。 三、实验材料 人口腔黏膜细胞、新鲜菠菜叶、洋葱鳞茎、颤藻和池塘水；酿酒酵母菌悬液、枯草芽孢杆菌斜面、金黄色葡萄球菌斜面、放线菌培养物、根霉培养物和平菇斜面；生霉的面包或馒头、橘皮。 各种动植物组织器官切片标本、细菌三型制片标本、青霉素制片标本及酵母菌制片标本。 四、实验器材与试剂 (一)器材 普通光学显微镜、放大镜、解剖器械、接种环、消毒牙签、载玻片、盖玻片、吸水纸、擦镜纸和酒精灯。 (二)试剂 醋酸洋红染液、0.1 mol/L稀碘液、0.1%碱性湖蓝BB、中性红·詹纳斯绿染液、乳酸石炭酸棉蓝染色液、石炭酸复红染色液、0.1%美蓝染色液、50%乙醇、香柏油、二甲苯和O.85%生理盐水。 五、实验操作 Ⅰ 光学显微镜的使用 (一)光学显微镜的构造 显微镜的种类繁多，结构也很复杂，但是无论哪一种显微镜，按其结构特点分可分为机械装置和光学系统两大部分(图1-1)。 1．机械装置 显微镜的机械装置是由精密而牢固的零件组成，主要包括镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等。 图 1-1 显微镜的外形 (1)镜座 是显微镜的基座，用以支持整个镜体的平稳。 (2)镜臂 镜臂的作用是支持镜筒、载物台、聚光器和调焦装置等。 (3)载物台 是镜臂基部的一个方形或圆形，放置玻片标本的平台。台中央有一个通光孔。台上有的装有标本片夹，有的装有附标尺的标本移动器，游标尺可用来测量标本的大小和标记被检部分。 (4)镜筒 是显微镜上部圆形中空的长筒。上端放置目镜，下端连接物镜转换器。其作用是保护成象的光路与亮度。 (5)物镜转换器 固着在镜筒的下端，可以左右自由转动，有3～4个螺旋圆孔，为安装物镜的部位。当旋转转换器时，即可把所需要倍数物镜固定在使用的位置上，使物镜与目镜的光线合轴。 (6)调焦装置 为了得到清晰的物象,必须调节物镜与标本之间的距离。使它与物镜的工作距离相等，这种操作叫调焦。在镜臂两侧有大小调焦螺旋各一对，旋转时可使镜筒上升或下降。大的一对是粗调焦手轮，调动镜筒的升降距离大，旋转一周可使镜筒移动2厘米左右，小的一对是微调焦手轮，调动镜筒距离小，旋转一周可使镜筒移动约0.1～0.2毫米。 (7)聚光器调节螺旋 在镜柱的左侧或右侧,旋转它时可使聚光器上下移动，借以调节光线，但简单的显微镜没有这种装置。 (8)倾斜关节 为连接镜柱与镜臂的关节，可使