-实验一显微镜的使用要点.pptVIP

二、用显微镜观察几种微生物的形态 观察链球菌，链杆菌，小球菌及八叠球菌 用铅笔画图，要画出圆形视野范围5-10个具有代表性的菌，注明放大倍数及菌名称 放大倍数表示法，如100X10 或1000X 显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积，公式为: M = K1 x K2 细菌的一般形态 个体形态和排列 球状 杆状 螺旋状 基本形态 三、环境中微生物的简单检测 实验报告(不要照抄书) 实验目的： 实验内容： 实验结果： 讨论：实验成败，原因分析及建议 下一次实验（3/22/13） （教材）实验十 微生物培养基的配制与灭菌 目镜 目镜的作用是把物镜放大的实象再放大一级，并把物象映入观察者的眼中，实质上目镜就是一个放大镜。显微镜的分辨率能力是由物镜的数值孔径所决定的，而目镜只是起放大作用。对于物镜不能分辨出的结构，目镜放的再大，也仍然不能分辨出。 聚光镜 聚光镜装在载物台的下方。小型的显微镜往往无聚光镜，在使用数值孔径0.40以上的物镜时，则必须具有聚光镜。聚光镜不仅可以弥补光量的不足和适当改变从光源射来的光的性质，而且将光线聚焦于被检物体上，以得到最好的照明效果。 聚光镜光栏 所谓光栏，从广义的角度可指一切限制入射光束截面的框孔都可认为光栏。 聚光镜光栏作用 （1）改变聚光镜的数值孔径以便与物镜的数值孔径相匹配，可调整图象的分辨率和反差。 （2）辅助调整亮度。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * 微生物学实验 办公室：生科楼C5014电话：025E-mail: shiliang@njau.edu.cn 师 亮 一、大型贵重物品使用登记制度二、实验课加强安全意识 防水，火，电 三、值日，4人/次 四、及时交作业(星期五5:30pm) 五、上课之前适当预习 实验室注意事项 《微生物学实验》学什么？ 四大技术 4. 显微镜与染色技术 2. 分离纯化技术 1. 灭菌和消毒技术 3. 接种和培养 Specimen Collection 采样 微生物研究的大概程序 4. Inspection 观察 5. Identification 鉴定 2. Incubation 培养 3. Isolation 分离 Five I Inoculation 接种 本学期实验内容安排 实验内容 对应教材顺序 一、显微镜使用、细菌形态观察和环境中微生物的检测 1 二、微生物培养基的配制与灭菌 10 三、土壤微生物的分离（稀释平板法和划线分离法） 14 四、细菌革兰氏染色 2、4 五、细菌芽孢和荚膜的染色 3 六、细菌鞭毛染色和运动性观察（半固体穿刺法） 3 七、真菌形态观察和微生物菌落形态比较 6 八、酵母细胞数量、大小的测定 9 九、细菌的生理生化特征测定 16 十、环境条件对微生物生长的影响（ 盐浓度，pH，温度） 15 十一、食品等材料中细菌总数和大肠菌群数量的检测 （开放设计性实验） 19 实验内容 对应教材顺序 实验课成绩核算 一、按时参加实验课（20%） 二、课间表现（30%） 三、按时交作业并较好完成（50%） 实验一、显微镜的使用、细菌形态观察和环境中微生物的检测 实验目的 了解油镜的工作原理 掌握油镜的使用 学习检测环境中微生物的简单方法 实验内容 油镜的使用 观察几种细菌的形态（八叠球菌，小球菌，链杆菌，链球菌） 检测环境中的微生物 一、有关显微镜的基础知识及如何使用显微镜 载物台 物镜 目镜 粗螺旋 细螺旋 （一）普通光学显微镜的基本结构 聚光器 光源 推进器 specimen retainer 切片夹 camera connection site 照相机接口 Objective lens switch 物镜转换器 光圈 瞳孔距调节 光强控制钮 介质 低倍镜（4X，10X） 高倍镜 （40X） 油镜（100X） 空气 香柏油 物镜： 折射率 η： 1 1.33 1.515 1.66 α溴萘 水 显微镜所能辨别物体两点之间最小距离为分辨率，以δ表示，其计算公式如下： δ=λ/2NA λ:光波的波长 NA：数值孔径 NA=ηSin(μ/2) μ:物镜镜口角 η=介质折射率 2 接物镜干燥系（A）和油浸系（B）的光线图 使用油浸系提高分辨率 η=1 η=1.5 日光的波长λ=0.56μm，如果NA=1.4，则δ=0.56/（2×1.4）=0.20μm； 如使用波长λ为0.27μm的紫外光，则δ=0