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中国农业科学 ， （）：
2003 36 4 443 - 447
Scientia Agricultura Sinica
传染性法氏囊病毒VP2 在酵母细胞内的高效表达及
其免疫原性研究
1 1 1 1 2 3
王笑梅 ，王牟平 ，高宏雷 ，付朝阳 ，曾祥伟 ，张守发
1
（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，兽医生物技术国家重点实验室，哈尔滨 15000 1；
2 3
东北农业大学动物医学院，哈尔滨 150030 ；延边大学农学院，吉林 133400 ）
摘要：应用 酵母表达系统高效表达了传染性法氏囊病毒（ ） 基因片段。首先用 设计
Pichia IBDV VP2 OLIGO 1
对引物 、 ，以插入 基因的 为模板，扩增出带有终止密码子的 片段，将此片段正向亚克
P5 P6 IBDV VP2 pUC19 1. 5 kb
隆到pPICZA 表达载体上，将构建好的载体 pPICVP2 用 SacI 内切酶线性化后，转染酵母 Pichia p astor is GS115 细
胞，经 鉴定，筛选出 多个重组子。分别用甲醇诱导后，经 凝胶电泳、琼脂扩散试验、
PCR 50 SDSDot-ELISA
检测，得到 个不同程度表达 活性蛋白的阳性重组子。经凝胶薄层扫描仪分析，表达蛋白占酵母细胞总
9 4 1ku VP2
- 1
蛋白的最高比率为 ，表达量为 · 。表达产物免疫 鸡可诱导产生特异性抗体，并能保护鸡抵抗
16 % 0 . 6208 g L SPF
超强毒致死性攻击，具有良好的免疫原性。
关键词：传染性法氏囊病病毒； ；酵母表达；免疫原性
VP2
Hi h-eff icienc Ex ression of the Ma or Ant i en Gene VP of
g y p j g 2
Infect i
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