低温胁迫下拟南芥表皮蜡质的响应机制.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(2):252-261 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.02.005 低温胁迫下拟南芥表皮蜡质的响应机制 倪 郁，宋 超，王小清 （西南大学农学与生物科技学院，重庆400716 ） 摘要： 【目的】低温是影响作物产量和品质的主要环境因素之一，而表皮蜡质是植物抵御外界胁迫的第一层 保护性屏障。研究低温胁迫对拟南芥表皮蜡质组分含量、结构及相关蜡质基因表达的影响，有助于进一步理解植 物表皮蜡质与低温互作机制，从而对后续作物的抗性机制研究起指导作用。【方法】以野生型拟南芥与蜡质突变体 cer1、cer3、cer4、cer6、cer10、cer20 及kcs1 为试验材料，待植株生长至5—6 周时进行4℃胁迫处理10 d 和 18 d。利用扫描电子显微镜观察表皮蜡质晶体结构变化；利用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS ）分析蜡质组成及含 量变化；利用qRT-PCR 技术检测蜡质基因CER1、CER3、CER4、KCS1、WIN1 的表达。【结果】低温胁迫后，拟南芥 蜡质晶体结构在分布密度、形状与大小方面发生了不同程度的变化。野生型拟南芥蜡质晶体熔融成片，大面积覆 盖茎秆表面，这可能一定程度上起到了低温阻隔作用，并减少水分散失。cer1 突变体表现出松针状晶体显著减少， 并以小型树枝状结构为主；cer3 与cer10 杆状晶体显著减少；而cer6 与cer20 蜡质晶体在低温胁迫后有所增加； kcs1 蜡质晶体在低温胁迫后垂直杆状结构显著减少，水平杆状结构出现，并伴有蜡质晶体熔融现象。低温胁迫对 一级醇减少突变体cer4 结构无显著影响。GC-MS 分析结果表明，拟南芥野生型与各突变体在低温胁迫下表皮蜡 质组分含量也发生了不同程度的变化。野生型中醛类与酮类含量显著减少、一级醇类含量显著增加。各突变体 则表现出相反的变化，蜡质组分中醛类、酮类含量增加或无显著变化、一级醇含量减少或无显著变化；受低温 胁迫较重的cer3﹑cer10 表皮蜡质中一级醇含量显著下降。拟南芥表皮蜡质在低温胁迫下显著积累（cer3 无显 著变化、cer10 蜡质总量减少），且主要通过增加烷类与次级醇含量来增加蜡质总量。低温胁迫诱导了野生型 CER1 基因的强势表达，植株通过上调 CER1 的表达促进烷类物质的合成以响应低温胁迫；CER4 的表达上调促 进了一级醇的合成。KCS1、CER3 与WIN1 在低温胁迫下表达下调，暗示了植株蜡质总量的增加主要是通过蜡质 合成的下游途径如烷合成途径增加。【结论】低温胁迫可以改变表皮蜡质晶体结构及组分含量，蜡质组分中烷类 与次级醇类含量的上升是响应低温胁迫的主要方式，蜡质总量的增加主要来自于烷类的增加。CER1 是响应低温 胁迫的主要蜡质基因。 关键词：拟南芥; 低温胁迫; 表皮蜡质; 基因; 蜡质突变体 Investigation on Response Mechanism of Epicuticular Wax on Arabidopsis thaliana Under Cold Stress NI Yu, SONG Chao, WANG Xiao-qing (College of Agronomy and Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400716) Abstract: 【Objective 】Cold stress is one of the factors influencing the quality and quantity of crops while the epicuticular wax is believed to be the first protective barrier of the plant to external stresses. In the