棉花GhSPS1的克隆及表达模式分析.pdfVIP

中国农业科学 20 12,45(6):1031-1041 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.06.001 棉花GhSPS1 的克隆及表达模式分析 1,2 1 1 1 1 贾荣荣 ，路莎莎 ，江 媛 ，刘增平 ，俞嘉宁 1 2 ( 陕西师范大学生命科学学院，西安 710062； 陕西省西安市曲江第一中学，西安 725281) 摘要：【目的】克隆棉花蔗糖磷酸合成酶基因（sucrose-phosphate synthase，SPS），并分析该基因在组织 和纤维发育不同阶段及不同非生物胁迫下的表达模式。【方法】采用genome-walking 及over-lap PCR 方法，获得 了棉花中一个蔗糖磷酸合成酶基因——GhSPS1，通过半定量PCR 法检测GhSPS1 在不同非生物胁迫条件下的表达模 式，采用实时荧光定量PCR 法对GhSPS1 及GhSUS3、GhINV、GhCESA4 进行组织和纤维发育特异性表达分析。【结果】 克隆得到的GhSPS1 全长4 545 bp，包含10 个内含子、11 个外显子，其开放读码框为3 108 bp，编码1 035 个 氨基酸，且该基因在ABA、低温处理条件下表达量增加，在高温胁迫下，表达量先升高后降低。实时荧光定量PCR 结果显示，GhSPS1 及GhSUS3 在各种组织中都有表达，其中，在0 DAF、3 DAF 的胚珠及18 DAF 的纤维中表达量 最高，而GhINV、GhCESA4 则分别在3—15 DAF 的纤维、18 DAF 的纤维中表达量最高。【结论】克隆得到的GhSPS1 属于SPSA 基因家族，能参与ABA、低温、高温等非生物胁迫应答，且可能在纤维发育的起始期及次生壁增厚初期 发挥作用。 关键词：蔗糖磷酸合成酶；棉花；逆境胁迫；纤维发育 Cloning and Analysis Expression Patterns of GhSPS1 Gene in Cotton 1,2 1 1 1 1 JIA Rong-rong , LU Sha-sha , JIANG Yuan , LIU Zeng-ping , YU Jia-ning 1 2 ( College of Life Science of Shaanxi Normol University, X i’an 710062; Xi ’an Qujiang No.1 High School Shaanxi Province, Xi’an 725281) Abstract: 【Objective 】 The GhSPS1 gene was cloned and analyzed the expression patterns under abiotic stresses treatments. In different tissues and at fiber developmental stages, transcriptional patterns of the gene were also detected. 【Method 】 The DNA and cDNA sequence