内蒙古绒山羊CRABP I基因的克隆及表达.pdfVIP

中国农业科学 2012,45(13):2743-2750 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.13.019 内蒙古绒山羊CRABP I基因的克隆及表达 1,2 2,3,4 1 3 1 李 华 , 苏立宁 , 刘东军 , 李雪峰 , 旭日干 1 2 （内蒙古大学生命科学院/哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室，呼和浩特 010021 ； 佛山科学技术学院，广东佛山 528231 ； 3 4 华南师范大学生命科学学院，广州 510000 ； 河北北方学院，河北张家口 075000 ） 摘要：【目的】克隆内蒙古绒山羊视黄酸结合蛋白Ⅰ（cellular retinoic acid binding proteinⅠ，CRABP Ⅰ）基因的cDNA，进行蛋白结构的预测和表达分析，为绒山羊毛和绒形成的分子机理奠定基础。【方法】利用RT-PCR 方法克隆内蒙古绒山羊 CRABPⅠ基因序列，利用生物信息学方法预测其蛋白结构，采用实时荧光定量 PCR 探讨该 基因在绒山羊 4 个胎儿日龄皮肤中的表达。【结果】内蒙古绒山羊 CRABP I 基因 cDNA 长 679 bp（JN936490），其 开放阅读框为414 bp，氨基酸序列与其它物种相比具有较高的序列相似性。CRABP Ⅰ蛋白无明显的信号肽和跨膜 区域，不存在N糖基化位点和O糖基化位点；蛋白二级结构主要由α 螺旋、β折叠和少量的转角及无规则卷曲构 成。胎儿皮肤中 CRABPⅠ基因在 90 d 的表达量明显高于 100、120 和 130 d（P0.05）。【结论】绒山羊的 CRABP Ⅰ基因 cDNA 中的开放阅读框（open reading frame，ORF）在不同物种间较为保守，但种属特异性集中表现在第 33和123氨基酸残基处，该基因在胎儿期的90 d表达量最大。 关键词：绒山羊; CRABPⅠ基因; 克隆; 基因表达; 生物信息学 Cloning and Expression of Cellular Retinoic Acid Binding Protein ⅠGene in Inner Mongolian Cashmere Goats 1,2 2,3,4 1 3 1 LI Hua , SU Li-ning , LIU Dong-jun , LI Xue-feng , XU Ri-gan 1 ( College of Life Sciences of Inner Mongolia University/The Key Laboratory for Mammalian Reproductive Biology and Biotechnology of Ministry of Education, Hohhot 010021 ; 2 3 Colleg