兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP） 基因克隆及其同源性比较.pdfVIP

中国农业科学 2013,46(3):639-646 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.03.021 兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP） 基因克隆及其同源性比较 1 2 2 1 1 2 2 2 1,2 徐红伟 ，柏家林 ，冯玉兰 ，曹 忻 ，蔡 勇 ，金方圆 ，达小强 ，杨具田 ，臧荣鑫 1 2 （西北民族大学实验中心，兰州 730030 ； 西北民族大学生命科学与工程学院，兰州 730030 ） 摘要：【目的】克隆兰州大尾羊心脏型肪酸结合蛋白（H-FABP）基因全长cDNA 序列，为研究绵羊H-FABP 生 物学作用和生产应用提供理论依据。【方法】根据已知哺乳动物H-FABP 基因 cDNA 序列，设计5和3特异引物， 运用cDNA 末端快速扩增（RACE）技术获得兰州大尾羊H-FABP 基因全长 cDNA 序列。【结果】 扩增获得兰州大尾 羊5端425 bp、3端231 bp 片段和 177 bp 中间片段，拼接获得748 bp 兰州大尾羊H-FABP 基因全长cDNA 序列 （GenBank 登录号：JQ780322）。 兰州大尾羊H-FABP 基因ORF 长 402 bp，编码 133 个氨基酸。核苷酸序列分析 显示兰州大尾羊H-FABP 基因序列与大多数哺乳动物相似，但其第66 位发生的碱基转换（T←→G）引起所编码的 第22 位天门冬氨酸（N）不同于其它所有物种的赖氨酸（K）。构建的基因进化树分析结果显示兰州大尾羊与山羊 亲缘关系最近。预测兰州大尾羊H-FABP 蛋白质的空间结构与山羊和牛H-FABP 类似，由2 个α螺旋和10 个反向平 行的β折叠组成，10 个折叠片围成一个桶状结构，疏水性残基位于桶内，用于结合脂肪酸。【结论】克隆了兰州 大尾羊H-FABP 基因，为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 关键词：兰州大尾羊；H-FABP 基因；cDNA 末端快速扩增；序列分析 Cloning and Sequence Analysis of the Full-Length cDNA of H-FABP Gene in Lanzhou Fat-Tailed Sheep 1 2 2 1 1 2 XU Hong-wei , BAI Jia-lin , FENG Yu-lan , CAO Xin , CAI Yong , JIN Fang-yuan , 2 2 1,2 DA Xiao-qiang , YANG Ju-tian , ZANG Rong-xin 1 2 （Science Experimental Center, Northwest University for Nationalities, Lanzhou 730030 ；College of Life Science and Engineering, Northwest University for Natio