朗德鹅肌肉生成抑制因子基因（MSTN）的克隆及其表达量与日粮能量、血清IGF-I和GH的关系.pdfVIP

中国农业科学 2008,41(1):221-228 Scientia Agricultura Sinica 朗德鹅肌肉生成抑制因子基因（MSTN）的克隆及其表达量与 日粮能量、血清IGF-I和GH的关系 1 1 2 1 1 1 1 胡骏鹏 ，李 翔 ，张碧绿 ，范卫星 ，曹爱青 ，赵阿勇 ，何瑞国 1 2 （华中农业大学动物科技学院，武汉 430070 ； 湖北省天门市畜牧局，湖北天门 431700 ） 摘要： 【目的】采用反转录－聚合酶链反应（RT-PCR）技术，克隆朗德鹅肌肉生成抑制因子基因（MSTN）， 研究 MSTN 基因表达和日粮能量及其部分血清激素含量的相互关系，了解 MSTN 的功能，为水禽分子营养和分子育 种提供基础资料。【方法】从朗德鹅（Anser anser ）的腿肌中抽提总RNA，用两步法RT-PCR扩增出MSTN基因的 cDNA编码序列，以pGEM-T Vector为载体，将该片段克隆到大肠杆菌（Escherichia coli ）中。通过筛选阳性克 隆，双酶切鉴定后测序；以MSTN基因的克隆为基础，以β-actin为内标，构建优化的半定量RT-PCR方法，研究 高中低（A:13.38MJ·kg-1 -1 -1 、B:12.13MJ·kg 、C:10.87MJ·kg ）3 种不同能量对朗德鹅 21 日龄和 70 日龄 2 个时期,肌 肉组织MSTN基因表达的差异；同时用放免法测定21、70 日龄的血清GH 和IGF-I浓度。【结果】克隆朗德鹅MSTN 基因cDNA的部分序列，其片段大小为1 128bp，编码375 个氨基酸组成的多肽，与已发表的鸡、鸭、鹅的MSTN 核 苷酸相似性分别为 94%、94%、99%；氨基酸的相似性分别为 98%、97%、98%；21 日龄时，朗德鹅公鹅、母鹅 MSTN 表达量差异不显著；70 日龄时朗德鹅公鹅 MSTN 的表达量情况为能量 A＞C＞B，朗德鹅母鹅 MSTN 的表达量情况为 C＞B＞A；对于朗德鹅 21～70 日龄阶段的生长，MSTN 基因的表达量和血清 IGF-I 的变化基本一致；与血清 GH 含 量之间并不存在很大关联，GH和能量的高低呈正相关。【结论】日粮能量对21日龄后朗德鹅MSTN基因的表达有 影响，且MSTN 基因表达量和血清IGF-I具有相关性，和血清GH无较大相关性。 关键词：朗德鹅；MSTN；肌肉组织；半定量RT－PCR；IGF-I；GH Cloning of MSTN Gene of Landes Goose and Research of Relationship Between MSTN Gene Expression and Different Energe Diets, or IGF-I and GH in Serum 1 1 2 1 1 1 1 HU Jun-peng , LI Xiang , ZHANG Bi-lü , FAN Wei-xing , CAO Ai-qing , ZHAO A-yong , HE Rui-guo 1 ( College of Animal Science, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070; 2 Animal Husbandry Bureau of T