水稻卷叶突变体rl15(t)的生理学分析及基因定位.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(14):2881-2888 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.14.018 水稻卷叶突变体rl15(t)的生理学分析及基因定位 张礼霞，刘合芹，于 新，王林友，范宏环，金庆生，王建军 （浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所，杭州 310021 ） 摘要：【目的】对环境诱导卷叶突变体开展生理学特性分析，并对候选的突变基因开展初步定位，为下一步 60 的基因克隆与功能分析提供研究基础。【方法】用 Co γ射线诱变粳稻品种日本晴（Nipponbare ）种子，发现了一 份叶片在晴朗天的正午时分高度内卷的突变体，命名为rl15(t) （rolled leaf 15 ）。通过田间种植鉴定，对该突 变体进行表型观察及主要农艺性状调查。采用不同温度和相对湿度处理 rl15(t)和野生型，以揭示影响突变体叶 片卷曲的环境因素。试验设置3 个处理温度（24℃、29℃、34℃）和2 个相对湿度（RH=60%或95% ），在人工气候 箱处理抽穗期的rl15(t)和野生型，以处理1.5 h 后的剑叶测定叶片卷曲度（RLI ）。自清晨6:00 时至下午18:00 时，每隔2 h 用便携式气体交换系统Li-6400 测定rl15(t)和野生型剑叶的净光合速率（Pn ）、蒸腾速率（Tr ）和 气孔导度（Gs ）等指标，同时用WP4 露点水势仪测定剑叶的叶片水势，分析并比较突变体和野生型的上述生理表 2 现的异同。将rl15(t)与野生型日本晴杂交，观察F 植株和F 群体的叶片表型，对F 表型分离进行χ 测验，分析 1 2 2 突变体的遗传行为。以rl15(t) ×珍汕97B 的F 群体为材料，利用BSA 法对候选基因进行定位。【结果】与野生型 2 亲本日本晴相比，rl15(t)突变体植株变矮、分蘖减少、穗长变短、籽粒变小、生育期延迟；rl15(t)突变体叶片 短窄且在阴雨天气或晴天的清晨和黄昏时表现为正常的平展或轻微内卷，但在晴朗天的正午时分表现高度内卷。 温度和湿度梯度处理试验表明，rl15(t)突变体叶片卷曲行为受环境诱导，湿度是诱导突变体叶片卷曲的主要因素， 高温可促进该表型的表现。rl15(t)突变体剑叶的净光合速率、蒸腾速率和气孔导度等光合参数以及叶片水势在清 晨和黄昏同野生型亲本较接近，但在正午时分均显著低于野生型；而rl15(t)突变体剑叶的水分利用效率 （WUE ） 在清晨、正午时分和黄昏与野生型接近，但在其他时段显著高于野生型。rl15(t)与野生型亲本日本晴的F 表现叶 1 片正常的平展，F 群体中平展叶与卷叶表型株符合 3 ﹕1 分离比，表明rl15(t)突变体的卷叶突变性状受1 对隐性 2 核基因控制。RL15(t)初步定位于水稻第 10 染色体长臂端SSR 标记RM25302 和RM25343 之间，与两标记的遗传距 离分别为0.8 和2.0 cM。【结论】突变体rl15(t)的卷叶表型是受环境诱导的，候选基因定位于SSR 标记RM25302 和RM25343 之间，该区段内未见同类表型基因的报道，推测RL15(t)可能是一个新