水稻斑马叶突变体zebra524的表型鉴定及候选基因分析.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(15):2907-2915 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.15.001 水稻斑马叶突变体zebra524 的表型鉴定及候选基因分析 李燕群，钟 萍，高志艳，朱柏羊，陈 丹，孙昌辉，王平荣，邓晓建 （四川农业大学水稻研究所，成都 611130 ） 摘要：【目的】对水稻斑马叶突变体zebra524 进行表型鉴定和候选基因分析，为进一步探讨该基因功能及在 农业生产上的应用奠定基础。【方法】用甲基磺酸乙酯（EMS ）诱变粳稻品种日本晴建立突变体库，从突变体库中 筛选得到1 份苗期为斑马叶的突变体，该突变体被命名为zebra524。对突变体的表型进行系统观察，并调查其主 要的农艺性状。然后，分别测量突变体苗期和孕穗期的叶片及灌浆期籽粒颖壳的光合色素含量。将突变体分别与 正常绿色品种进行杂交，并调查杂交F 叶色表型和F 群体叶色分离情况。利用zebra524 ×冈46B 的F 作为定位群 1 2 2 体，对zebra524 突变体进行基因定位和候选基因遴选，并进行DNA 测序验证及编码蛋白序列同源性分析。【结果】 zebra524 突变体表现为苗期叶片白色和淡绿色横向相间的斑马叶，孕穗期叶片上白色的区域完全转变为淡绿叶并 且新长出的叶子表现为淡绿色，抽穗至灌浆结实期籽粒的颖壳苍白色，成熟期节呈褐色、节间基部呈粉红色、胚 和颖果基部呈橙红色以及在黑暗条件下培养萌发的胚芽呈橙红色。该突变体苗期及孕穗期叶片叶绿素含量分别降 低 82.8%和20.9%，类胡萝卜素含量分别降低 64.7%和 32.6%；灌浆结实期籽粒颖壳的叶绿素和胡萝卜素含量分别 降低38.1%和42.8%。成熟期，zebra524 突变体的株高、每穗着粒数、结实率和千粒重比野生型分别减少12.3%、 9.5%、13.0%和 5.4%。zebra524 突变体F 的植株叶片表现为正常的绿色，杂交 F 群体中正常植株与突变植株分 1 2 离明显，正常叶色植株数目与突变植株数目的比值接近3 ﹕1，表明zebra524 的突变性状是由1 对隐性核基因控 制。该突变基因被定位于第2 染色体短臂上的SSR 标记RM7082 和InDel标记Y2 之间，遗传距离分别为0.5 cM 和 1.7 cM，这2 个标记之间的物理距离约为235 kb。序列分析发现，zebra524 突变体在LOC_Os02g09750 编码区第 235 碱基处碱基G 突变为碱基T，使得编码蛋白的氨基酸序列第79 位甘氨酸 （Gly ）突变成半胱氨酸 （Cys ）。【结 论】zebra524 的突变基因与已报道的β-OsLCY 等位，该突变体表型可能是由于β-OsLCY 发生单碱基突变造成的。 关键词：水稻；斑马叶突变体；遗传分析；类胡萝卜素；β-OsLCY Morphological Characterization and Candidate Gene Analysis of Zebra Leaf Mutant zebra524 in Rice LI Yan-qun, ZHONG Ping, GAO Zhi-yan, ZHU Bai-yang, CHEN Dan, SUN Chang-hui, WANG Ping-rong, DENG Xiao-jian (Rice Research Institute, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130 )