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中国农业科学 2015,48(6):1219-1227
Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.06.17
水稻颖花开放前花器官茉莉酸水平变化及
浆片茉莉酸信号基因表达分析
1 1 1, 2 1 1
黄俊宝 ,何永明 ,曾晓春 ,向妙莲 ,付永琦
1
(江西农业大学农学院/作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室/江西省作物生理生态与遗传育种重点实验室,南昌 330045 ;
2 宜春学院生命科学与资源环境学院,江西宜春 336000 )
摘要:【目的】水稻颖花开放是由浆片膨大所启动的,并与花丝伸长和花药开裂同步发生。脂类衍生的茉莉
酸(JA)激素在植物生殖发育中发挥重要调控作用。本文分析水稻颖花开放过程中花器官 JA 水平及浆片 JA 信号
基因表达的动态变化,以进一步揭示内源JA信号在水稻颖花开放中的作用。【方法】以粳稻中花11颖花自然开放
前18 h(18 h BF)和临近开放时0 h(0 h BF)的颖花器官(小穗梗、内外稃、浆片、雄蕊、雌蕊)为试验材料。
100 mg液氮研磨的样品经甲醇 ﹕水 ﹕乙酸(80 ﹕19 ﹕1,体积比)混合液提取、氮气浓缩和0.22 μm滤膜过滤后,
直接应用超高速液相色谱-电喷雾-质谱系统(UFLC-ESI-MS)测定 JA 含量。Trizol 试剂提取水稻总 RNA,DNase
Ⅰ消化残存的基因组 DNA,M-MLV 逆转录酶合成第一链 cDNAs。JA 生物合成和信号转导相关基因的表达分析采用
SYBR Green实时定量 PCR技术,以水稻 GAPDH 作内参。试验设置2次生物学重复,差异显著性分析采用 t 测验。
【结果】水稻颖花开放前18 h,花器官中小穗梗JA水平(16.0 ng·g-1 -1
FW)最高,内外稃次之(6.1 ng·g FW),
雄蕊、浆片和雌蕊极低(小于4.0 ng·g-1 FW)。颖花开放时,小穗梗JA水平下降了69%,内外稃升高了71%,雌蕊、
雄蕊和浆片 JA 水平分别上升至 19.0、77.2 和 52.4 ng·g-1 FW。颖花开放时雄蕊和浆片的 JA 水平显著高于其他花
器官,而小穗梗JA含量最低。与JA水平变化相一致,颖花开放时JA生物合成相关基因 OsDAD1、OsAOS1、OsAOC
及 OsOPR7 在雄蕊和浆片中的表达大幅上升,在内外稃中略有上升,而在小穗梗中的表达明显下调。但是,颖花开
放时这些 JA 生物合成相关基因在雌蕊中的表达不上调,与 JA 水平变化不一致。OsLOX2 和 OsAOS2 在小穗梗和内
外稃中的表达水平较高,而在浆片、雄蕊、雌蕊中的表达水平极低。伴随颖花开放时浆片JA水平的大幅上升,浆
片JA信号转导途径相关基因 OsJAR1、OsCOI1b 以及13 个OsJAZs 的表达也明显上调。其中,OsJAZ11 的表达水平
上升幅度最大,升高了近520倍。然而, OsJAR2、OsCOI1a、OsCOI2、OsJAZ5 和 OsJAZ15 在浆片中的表达没有上
调。【结论】内源JA在水稻颖花器官中的分布具有组织和发育时期特异性。结合外源JA对水稻颖花开放的灵敏诱
导,颖花开放时浆片JA的积累以及JA生物合成和信号转导途径相关基因的差异性激活,强烈表明内源JA信号介
导水稻浆片膨大的调控。
关键词:水稻;颖花开放;颖花器官;茉莉酸;浆片膨大;基因表达
Changes of JA Levels in Floral Organs and Expression An
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