甜菜幼苗低温和长日照诱导表达基因的克隆和序列分析.pdfVIP

中国农业科学 2005,38(9):1856-1862 Scientia Agricultura Sinica 甜菜幼苗低温和长日照诱导表达基因的克隆和序列分析 1,4 2 5 3 3 戴建军 ，常 缨 ，张美萍 ，李彩凤 ，马凤鸣 1 2 3 （东北农业大学农学院，哈尔滨 150030 ； 东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030 ； 东北农业大学农学院，哈尔滨 150030 ； 4 5 华南农业大学资源与环境学院，广州 510642 ； 吉林农业大学生命科学学院，长春 130118 ） 摘要：以代表性差异分析cDNA-RDA(representational difference analysis of cDNA)方法获得在低温和长 日照诱导甜菜(Beta vulgaris L)幼苗茎尖中差异表达的基因片段 DP3，并进行了 cDNA 的末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends），经 RT-PCR 扩增和基因组 DNA 中 PCR 扩增，克隆测序后获得 1 个全长 609 bp 的 cDNA和855 bp 的DNA序列，分别命名为 Ty7Br600 和 Ty7Br900，并在GenBank注册，登录号分别为AY324115 和 AY324114。在GenBank中比较未发现同源序列，可能为新基因。序列分析发现，Ty7Br600 具有1个编码136个氨 基酸的开放读码框（ORF）, Ty7Br900 序列中存在1个内含子。分别以克隆的低温诱导甜菜幼苗cDNA为探针，分 别进行Northern印记和Southern印记杂交。结果表明，cDNA差异片段只在低温诱导的甜菜中表达，在甜菜基因 组中以2个拷贝或低拷贝形式存在。 关键词：甜菜(Beta vulgaris L)；低温和长日照诱导；代表性差异分析；基因克隆；序列分析 Cloning and Sequence Analysis of Cold and Longday Induced Expressed Genes from Sugar Beet (Beta vulgaris L.) Seedlings 1,4 2 5 3 3 DAI Jian-jun , CHANG Ying , ZHANG Mei-ping , LI Cai-feng , MA Feng-ming 1 2 ( Agricultural College, Northeast Agricultural University, Harbin 150030 ; Life Sciences College, Northeast Agricultural University, Harbin 150030 ; 3Agricultural College , Northeast Agricultural University, Harbin 150030 ; 4Resources and Environmental College, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; 5Life Sciences College, J