小麦糖原合成酶激酶(TaGSK1)表达载体的构建及原核表达.pdfVIP

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中国农业科学 2004,37(11):1593-1597 Scientia Agricultura Sinica 小麦糖原合成酶激酶 TaGSK1表达载体的构建及原核表达 徐 涛 马闻师 沈银柱 张庆祝 齐志广 黄占景 河北师范大学生命科学学院 石家庄 050016 摘要 利用PCR技术 以糖原合成酶激酶 TaGSK1基因的pDT-23质粒为模板 对小麦Tagsk1基因进行了 扩增和测序 将之转入原核表达载体pBV221得到pBV221-gsk1用之分别转化大场杆菌DH5和BL21均检测 -1 到相对分子量为43.5kD的表达产物TaGSK1蛋白 表达量分别为8%和10.8% 在0.31mol·L NaCl浓度下 转 化子的耐盐能力比受体菌明显提高 关键词 小麦 糖原合成酶激酶 原核表达 耐盐性分析 Construction of Triticum aestium L. Glycogen Synthase Kinase (TaGSK1) Expression Vector and Its Prokaryotic Expression XU Tao, MA Wen-shi, SHEN Yin-zhu, ZHANG Qing-zhu, QI Zhi-gung, HUANG Zhan-j ing (College of Life Science, Hebei Normal University, Shijiazhuang 050016 ) Abstract: Utilizing plasmid pDT-23 containing Tagsk1 as template, Tagsk1 was amplified and sequenced, and then ligased it into prokaryotic expression vector pBV221, then the pBV221-gsk1 was obtained . Tagsk1 expressed 43.5kD protein both in E.coli DH5á and BL21 whose expression amount were 8% and 10.8% respectively. Tagsk1 improved the transformants’ salt tolerance -1 greatly at the concentration of 0.31 mol· L NaCl. Key words: Wheat; TaGSK1; Prokaryotic expression; Salt-tolerance analyze [1] 自1989年首次克隆植物蛋白激酶基因以来 已 靠蛋白激酶的作用将ATP(其次为GTP) 位的磷酸基 [2] 在番茄 芒果和苹果等多种植物的不同器官中检测到 团转移到底物氨基酸残基上实现蛋白的磷酸化 关 蛋白激酶[2~ 10] 它所催化的蛋白质磷酸化和去磷酸化 于蛋白激酶在植物抗逆中的作用正在研究之中 河北 过程已被证明在植物对光照 温度(冷 热) 外力

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