三株好氧反硝化的分离鉴定及特性研究.pdfVIP

三株好氧反硝化菌的分离鉴定及特性研究 摘要 好氧反硝化菌在生物除氮中具有重要作用，但相关研究的文献报道较少。本文从自然 环境中分离具有高效去除亚硝态氮活性的好氧反硝化菌，并对其生理生化及降解亚硝态氮 特性进行研究。 从沿海滩涂、红树林、虾塘、植物根系等活性淤泥中采集样品，利用反硝化培养基和 硅胶平板进行好氧反硝化菌的分离。从各种活性淤泥中分离得到11株好氧反硝化菌，根 据各菌株的脱氮效果优选活性较好的三株菌作进一步的试验。通过对三株菌的显微镜观 察、生化试验、16S sp．)。 研究发现，三株好氧反硝化菌在好氧条件下均具有较好的反硝化活性，当亚硝态氮 初始浓度为2500 h内的亚硝态氮去除率分别达到47％、 mg／L时，菌株F4、F6和F7在48 64％和45％。 以反硝化培养基(DM)为基础，添加不同的碳源、氮源和金属离子，设计不同的碳 硝化活性的影响，结果表明：三株菌均能利用酒石酸钾钠、乙酸钠、丁二酸钠、枸橼酸钠 作为唯一碳源，而三株菌以酒石酸钾钠为碳源时反硝化活性最高；在C／N小于12的情 况下，三株菌的反硝化活性随着C／N的增加而快速升高；三株菌均嗜好弱碱性环境 mg／L-3000mg／L时，三株菌的反硝化活性随着亚硝态氮浓度的逐渐升高而持续下降；不同 用牛津杯双层平板定量扩散法检测三株菌代谢产物的抑菌活性，结果表明：三株菌对 金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均没有抑制作用；通过药敏试验发现，菌株F6对多数抗菌 F4的胞外代谢产物，表明其胞外代谢产物中含有色素物质，初步确定该物质为菌绿素。 利用正交试验设计，对菌株F6进行培养基和培养条件的优化。最终得出培养基的优 0．6 化组合是：酒石酸钾钠2％、KN020．25％、K2HP04 960、MgS04·7H20 0．01％oi培养条件的优化组合是：培养温度为30℃；接种量为5％；摇床180r／min培养 h。 48 及其养殖水体进行了应用试验，结果表明：制备好氧反硝化菌固定化小球的最佳组合是： 海藻酸钠为主要载体，浓度为4％，添加1．5％粉末活性炭和4％CaCh溶液；固定化菌株 F6对亚硝态氮的降解效果明显优于游离菌，能显著提高罗非鱼的增重及超氧化物歧化酶的 活性，且能提高养殖水体pH值。 关键词：好氧反硝化菌，分离鉴定，亚硝态氮，固定化菌，罗非鱼 Ⅱ Isolationand CharacteristicsofThreeAerobic Bacteria Denitrifying Abstract Aerobic bacteriaan roleinthe removal denitrifyingplayimportant biologicalnitrogen werefewstudieson process．However,there aerobic bacteria．theisolationand denitrifying characteristicsaerobic of bacteriawith nitrite from denitrifying higll removingability environmentalwere samples