冬枣黑斑型果实害的发生规律及生物防治研究.pdfVIP

摘要 2002～2∞4年在山东瘩沾化县林^k局试验场和山东氆东营市河口区太和村的枣 园，对冬枣J：9妻斑型果实病害透舒分离，经轲赫氏法则验证，确定名如≯铷如 8如r阳船触)胎船彪r为引起冬枣黑斑型果实病害的病原茵，其作为冬枣果实痛害的病 原茵尚未见报道。 对冬枣黑斑型果实病害田问发生规律进行了研究，发现病原在花朵中分离获得的 比例最高，达到32．5％，谢花后20d弱幼果带菌率为5。3曲．O％，明显高于谢藏后lOd 的幼果的带蓠率，1．爵~2．3％；7月下旬病果率为l。4～4。2％，为病果的初发生礤，之后 病果率逐渐增加，到8月下旬病暴率达到8．6~17．6％，为病害的盛发期，9月份部分 病果脱落，病果率为5．2～16．6％；调查结果表明：花芽为病原的初侵染源，冬枣黑斑 型果实病害的发病盛期为8月下旬。 逮过对冬枣健康与染病果实舍酸量、暴胶含量、单宁含量、可溶性糖含羹等内含 x 物的测定比较发瑰，90目龄的病果含籁量为1．62lo。mol兄，相对健果较低，到{20 日龄病果含酸赞降互1．28×10。mol，L；90日龄和120日龄染病果实中不溶性果胶含 量为2．26％和1．50％，相对于这两个时期健康果实的1．73％和O．96％，明嶷增高；染 病果实在90盛龄和120日龄单宁含量为O38％和O，32％，相对这两个时期键康暴实 单宁含量的O。42％=秘O．36％，略微下降；染病果实在粥日龄争120日龄可溶挂糖含 龄健果的可溶性糖含量比染病果实的可溶性糖含量上升明显。试验结果表明，病原侵 染后引起果实内含物的变化，特剐楚策酸、单宁含量的避一步降低。 于2004年在中国椿业科学研究院林业研究所生理生化实验室，对冬枣黑斑型 病暴不同发病程度幕实病程耱美酶、镏脆壁降鼹酶避行了潮定，秀载用气稳色谱法 对果实内挥发性物质遗行了比较。发琉PpO活力在4级发病程度前由5。2g．Fw．m洒。 迅速上升为14．7 Fwmin～，PAL活力也在4级发病程 g．Fwmin_1，之后下降为5．359 病程度果实细胞壁降解酶的比较发现，1~3级发病程度的冬枣果实蛋白酶、脂肪酶 活力由13％变为下降为O．45％，而l—4级发病程度的冬枣果实果胶酶的活力从ll，4％ 蹭至24．8％，之詹，降至19．2％，但直到果实严重发病(S级)仍保持较离活性。同 时，通过气相色谱法对染病果实和健康果实的芳香性物质进行了比较，发现染病果 min 实和健康果实的芳香性物质种类总体上趋于一致，但是含量上存在一定差异，36 后染病果实出现了两种健康果实所不具有的两种挥发性芳香类物质。果实病程相关 酶PPo、PAL和蛋白酶、脂肪酶、果胶酶等细胞壁降解酶，在4级发病程度发病前 后变化剧烈，这种变化与在田间这种发病程度果实病斑快速扩展的发生规律相吻 合。 以冬枣黑斑型果实病害的病原菌为靶标，在山东省滨州市、东营市、莱阳等地区 采集土样78处，分离单菌落130余株，利用平板对峙法对其进行了室内进行拮抗菌 株的生物筛选。选取其中4株对冬枣黑斑型果实病害病原菌丝具有较强抑制作用的菌 株，进行液体发酵试验，测定了发酵液对病原孢子萌发的抑制效果，发现xLl2菌株 48h发酵液对病原孢子萌发抑制效果显著，达到80％，优于其他菌株；对xLl2菌株 发酵液具有抑菌活性的组分进行测定，结果表明xLl2菌株发酵液蛋白组分对 彳肌rn咿抽口抛M口m菌丝抑制率可达91．6％，具有较强的抑菌效果；继而对xLl2菌株 蛋白量与抑制效果的相关性进行了测定，发现10％硫酸铵分离出蛋白组分为208ug／ml 时，生物测定的菌落直径为38．Omm，接近无抑菌活性，而60％以上饱和度时，蛋白 组分为5614Hg／mg以上，抑菌活性明显，其中70％时抑菌活性为94．3％，达最高值； 本试验还对xLl2菌株蛋白组分对冬枣黑斑型果实病害病原茵的抑制机理进行了初步 研究，发现经其处理的菌丝和孢子的细胞壁变薄，甚至消融，原生质泄漏；通过对 xLl2菌株产生抗菌蛋白的生物特性的初步研究，发现产生抗菌蛋白组分最经济的发 酵时间为72h，最适宜的碳源和氮源(摩尔比)的比例为30：1，最适宜的发酵温度 为30～35℃，最佳搅拌速度为220Lmin-1，最适宜的接种量为O．