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受精卵胞质注射生产转基因兔的初步研究

受精卵胞质注射法生产转基因兔的初步研究 摘要 本研究通过探讨受精卵胞质注射法生产转基因兔的相关影响因素,为 建立受精卵胞质注射法生产转基因动物的技术平台奠定基础。 一、探讨了家兔体重和不同来源FSH对其超数排卵效果的影响。结果显 示,体重超过3k母兔进行超排,卵巢上的平均排卵点与回收的平均胚胎 25.75±6.50) (尸nD7);用中国科学院动物所生产的FSH对母兔进行超排处理,卵巢上 (21.63士8.34,19.67士8.62)比较差异极显著(PDDJ)。 二、对受精卵胞质注射法生产转基因兔的相关影响因素进行了研究, 通过比较兔受精卵胞质注射不同体积和浓度的FAT-1质粒DNA及胚龄对胚 胎发育潜力以及转基因效果的影响,以探讨受精卵胞质注射法生产转基因 精卵胞质注射法生产的286枚转基因胚胎分别移入11只同期发情的受体母 兔,结果有2只受体母兔怀孕。其中一只母兔在妊娠到24天时流产,另外 b10t检测 以及冷冻切片观察,证明所生两只仔兔均携带有外源基因。 以上结果表明:(1)供体母兔体重和FSH来源均对家兔的超排效果有 显著影响,应选用中国科学院动物所的FSH对3坞以上的母兔进行超排处 理,以获得理想的超排效果;(2)采用受精卵胞质注射法可成功制备转基 因兔;(3)外源基因的浓度和注射的量以及注射的受精卵阶段可影响兔受 精卵胞质注射胚胎的发育和转基因效果,选用注射HCG后16h回收的兔受 育并提高转基因的效率。 关键词:兔超数排卵受精卵胞质注射转基因检测 H PRELIMINARY STUDIESONTHEPRODUCTIONOF TRANSGENlC RABBITBYZYGoTE INJECTIoN ABSTRACT Inordertoes协bliShamethodfor producillgtr觚sgenic ectioninrabbit a髓ctingzygotecytopl锄icinj were m investigatedtllis咖dy. 0n ofral)bitwere Firstly,f缸ors t11e super0Ⅶlation ofdonorralbbitandthe sourCeofFSH.The weight resultssho、vedthatdonor rabbitsfor oVer more superoVulationweight 3kgyielded 2.5to emb巧os(40.56±7.2)than、№ight舶m less (P0·05)andweightt11觚2.5l(g group(8.86±4.56)俨O.O 1).Average of

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