猪精液5ml细冷冻保存技术研究.pdfVIP

摘 要 对上海白猪精液的冷冻分装方法、冷冻方法、稀释液及添加剂、甘油浓度、精子 密度、解冻温度及时间等技术环节进行了研究，并对冻融前后的精子进行了电镜观察， 记录了试验过程中的温度，描绘了不同的冷冻温度曲线。旨在探索猪精液5ml细管 冷冻保存技术体系，为猪精液冷冻保存及商业化生产提供技术支撑。试验结果如下： 猪精液颗粒、O．25ml细管、5ml细管之间，冷冻后精子活力和活率的差异不显 但与5ml细管之间差异不显著(户0．05)。按不同的始冻温度、平衡温度、入氮温 度绘制了三种精液冷冻方式的冷冻温度曲线。 在使用的四种稀释液中，4号(LEY)稀释液冷冻解冻后的精子活力、弯尾率和 顶体完整率显著高于其他三种稀释液(P0．05)，活率极显著高于其他三种稀释液(P 0．01)。 比较5mI细管冷冻甘油终浓度为l％、2％、3％、4％，5％的稀释精液，2％、3％ 的甘油浓度能有效保护冻后精子活力、活率和顶体，1％～3％的甘油浓度能有效保护 精子质膜。 5ml细管冷冻时距离液氮面不同高度冷冻，距离液氮面3cm高冷冻，熏蒸时温 度回升幅度较小，解冻后的精子质量高于距离液氮面5锄高冷冻，但二者差异不显 著(P0．05)．并分别绘制两者的冷冻温度曲线． 稀释液添加剂试验表明，0．05％、O．1％的N．乙酰-D-氨基葡萄糖能有效保护精子 mmol／L咖啡因显著降低了冻 顶体，咖啡因提高了精子的冻后活力(P0．05)，2～8 5ml细管冷冻密度分别为2．O×109个／ml、1．5×109个／nil、1．0X109个／ml的猪精 子，解冻后精子质量差异不显著(P0．05)。 干解法和湿解法解冻颗粒冻精的效果差异不显著(P0．05)．5ml细管冻精在不 同温度、不同时间解冻，随着解冻温度的升高，解冻后精子活力和活率也升高，弯尾 率先升高后降低，且较高的解冻温度对精子项体有害。在所有解冻组中52℃35s和 45℃70s是解冻效果最好的组合． 本试验推荐的猪精液5ml细管冷冻保存程序为：用LEY稀释液稀释精液，甘油 终浓度为2％、精子密度为2．0×109个／ml，5mI细管分装后距离液氮面3crn处冷冻， 咖． 关键词：猪，冷冻精液，细管冷冻，精子密度，质量检查 1 声 J 1 -- on onBoarSemen Technology StudyFreezing—Preservation Frozenin5mlStraws LILin—lin MA De-fu Directed by Heng-dong，ZI-IANG ofAnimalScienceand (College Technology， Sichuan Agricultural Abstract