修改-制备色谱分离技术要点.ppt

模拟移动床色谱应用 工业手性药物大规模拆 第六节 亲和色谱分离技术 亲和色谱法：利用生物大分子与某些对应的专一分子特异识别和可逆结合的特性而建立起来的一种色谱方法。 如抗原与抗体，酶与底物，激素与受体等 广泛用于酶、抗体、核酸、激素等的分离与纯化，特别是对含量极少而又不稳定的活性物质最有效。 一、基本原理 亲和色谱是应用生物分子对它的互补结合体（配基）的生物识别能力，使目标产物得以分离纯化的液相层析法。 配基的固定化 吸附样品 样品解析（洗脱） 具有亲和力的两个分子中的一个（配基）以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂 样品（流动相）流经层析柱时，配基选择性吸附目的分子，杂质不能被吸附而流出。 选择适宜的条件将被吸附的目的分子洗脱 配基 载体 亲和层析 亲和物 杂质 + 洗涤 洗脱 再生 二、载体的选择 ① 载体为不溶性的多孔网状结构及良好的渗透性。 ② 载体必须具有较高的物理化学稳定性、生物惰性及机械强度。 ③ 载体必须具有亲水性和水不溶性，无非特异性吸附。 ④ 含有可活化的反应基团，有利于亲和配基的固定化。 ⑤ 能够抵抗微生物和酶的侵蚀。 三、配基的选择 ① 特殊配基：抗原的抗体，酶的专一抑制剂，激素的受体 ② 通用配基：可适于一类物质的分离提纯。 一个理想的配基应具有以下性质 配基与配体的亲和具有专一性。 配体与培基之间有足够的亲和力，但两者