医学生物化学实验讲义要点.docVIP

目 录 实验室守则实验记录及实验报告实验一 淀粉的提取………………………………………………… 6 实验二 还原糖的滴定分析………………………………………… 8 实验三 酶的基本性质考察：影响酶活性的因素…………………11 实验四 底物浓度对酶活力的影响（米氏常数的测定）…………15 实验五 纸层析法分离鉴定氨基酸…………………………………18 实验六 蛋白质的定量分析：双缩脲法测定血清总蛋白…………22 实验七 ………………………………………… 37 实验八 维生素C的定量测定………………………………………41 实验九 酪蛋白的制备… ……………………………………………47实验十 ……………………48 第二部分：系统性实验 实验十一 血红蛋白的提取和分离…………………………………… 实验十二 凝胶过滤层析纯化血红蛋白………………………………5 实验十三 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血红蛋白………………5 实验十四 血红蛋白与高铁血红蛋白分子吸收光谱的绘制与比较…6 实验十五 SDS标准工作曲线法定量测定血红蛋白 ……………… 6 实验十六 脱辅基血红蛋白的制备和重组 ………………………… 附录……………………………………………………………………… 7实验室守则 一、遵守纪律，认真实验 每个学员应该自觉地遵守课堂纪律，维护课堂秩序，保持室内安静，不大声谈笑。实验过程中要听从教师指导，严格认真地按操作规程进行实验。并简要、准确地将实验结果和数据记录在实验记录本上，完成实验后经教师检查同意，方可离开实验室、实验后要认真写好实验报告，由课代表按期收交给教师，不得无故拖延。 二、保持整洁 保持环境和仪器的整齐清洁是做好实验的重要条件，也是每个实验者必须养成的良好的工作习惯。实验台面和试剂药品架上都必须保持整洁，仪器药品放置要有次序，不要把试剂、药品洒在实验台面和地上，废液应倒进水槽内（强酸强碱必须都应倒入废品缸内，不可倒入水槽或随便丢弃。实验完毕需将仪器洗净收好，药品试排列整齐。把实验台面抹擦干净，保持实验室整齐清洁。） 三、药品使用 1、使用药品试剂必须注意节约杜绝浪费，要特别注意保持药品和试剂的纯净，药品用后须立即将瓶盖塞紧放回原处，从瓶中取出的试剂，标准溶液等，如未用尽切勿倒回瓶内，避免混杂与污染 2、任何装有化学药品的容器都必须贴上标签，注明其内容及配制时间。 3、在使用任何化学药品前，一定要熟知该化学药品之性质。 4、在使用任何化学药品时，一定要穿着工作服，必要时应配戴必要的个人防护具，如防护服、防护手套等。使用时务必仔细小心。 四、仪器使用 各种仪器用具均应注意爱护，细心使用，防止损坏，使用分析天平，分光光度计和电动离心机等贵重精密仪器，要严格遵守操作规程，发现故障立即报告教师，不要自己动手检修，要爱护公共财产，厉行节约。 五、注意安全 为了有效地维护实验室安全，保证实验正常进行，要求： 1、要严格做到：火着人在，人走火灭。 2、勿使乙醚、丙酮、醇类等易燃液体接近火焰，蒸发或加热此类液体时，必须在水浴上进行，切勿用明火直接加热。 3、凡比水轻且不与水相混溶之物（如醚、苯、汽油等）着火时，应迅速用湿毛巾覆盖火焰，以隔绝空气使其熄灭，绝不能倒水于其上，以免火焰蔓延，对于易与水混溶之物（如乙醇、丙酮等）着火时，可用火扑灭之。 4、有不少药品是有毒或有腐蚀性的不可用手直接拿药品，不可将试剂瓶直接对准鼻子嗅闻，更不可品尝药品味道。吸取有毒试剂，强酸和强碱时，均应用洗耳球，严禁用口吸取。 5、离开实验室时，要关好水龙头，拉下电闸，认真负责地进行检查，严防不安全事故。 6、每次实验课由班长安排同学轮流值日，值日生要负责当天实验室的卫生、安全和一切服务性工作。 六、意外事件处理 （一）发生可控制的火灾时，使用附近的灭火器，应注意灭火器的类型，按以下步骤进行操作： a、揭开环状保险栓。 b、挤压杠杆。 c、将喷嘴对火苗底部。 2、若是衣服着火，可用湿布掩盖，以达到窒息火苗的目的。 3、若是电线失火，应立即关闭电源后灭火。 4、迅速向实验室负责人报告。 （二）当发生无法控制的火灾时： 1、立即通知实验室其他人员，撤离人员、重要物资。 2、离开实验室时应将所有电源关掉。 3、立即拨打火警电话。 （三）当发生人身意外伤害时，伤者需要立即送医，并报告实验室安全负责人。 严守规范 整洁有序 实验记录及实验报告 一、实验记录 实验课前应认真预习，将实验名称、目的和要求、原理、实验内容、操作方法和步骤等详细地写在记录本中。 实验记录本应标上页数，不要撕去任何一页，不要抹擦及涂改，写错时可以准确地划去重写，记录时必须使用钢笔或圆珠笔。 实验中观察到的现象，结果和数据，应