gateway术构建交链孢菌jh505菌株cdna文库及激活蛋白基因的克隆.pdfVIP

Gatewa，技术构建交链袍菌JH505菌株 cDNA文库及激活蛋白基因的克隆 摘 要 新型微生物蛋白质农药最近几年才出现的一种新农药，是对多种农作物具 有很强生物活性的一类蛋白质药物，它正逐步成为生物农药发展的一个趋势。 过敏蛋白Harpin是一种从病原细菌分离出，分子量约44KD、能激发HR的蛋 白类激发子总称。2001年美国Cornell大学和EDEN生物科技公司基于过敏蛋 白中共同开发和研制成功了具有抗病防虫功能的广谱性无公害微生物蛋白农药 Messenger，开创了新型微生物蛋白农药的兴起。Elicitins是一类从主要从疫 霉属和腐霉属分离出、能在烟草上HR和SAR的小分子耐热胞外蛋白质的总称。 通过把编码Harpin和Elicitins蛋白基因导入植物，使植物获得广谱抗病性。 邱德文博士从交链抱菌纯化出一类新型的蛋白质，分子量从 35-62KDo氨基酸 和核酸序列分析表明其氨基酸和基因的序列完全不同于Harpin蛋白和 Elicitins蛋白，与蛋白质数据库中己知的蛋白序列均无同源性，属于一类全 新的蛋白，并命名为激活蛋白.目前还没有关克隆编码激活蛋白基因的成功报 道。本实验采用国际上目前最新的Gateway技术构建起交链抱属 JH505菌株 cDNA文库，以克隆编码激活蛋白的基因。经检测，入门文库的滴度达到1X100, 文库总容量为9X10cfu