家蚕黄体色突变iem体表色素sp的分离纯化与鉴定.pdfVIP

摘要 研究表明SP在生物的细胞代谢过程中有着重要的辅助作用，它是形成昆虫体色的主要 内源性色素之一，也是GTP分解代谢通路中的代谢中间体。对于哺乳动物而言，SP则 香族氨基酸单氧化酶如色氨酸羟化酶、酪氨酸羟化酶和苯丙氨酸羟化酶的重要辅酶， 也是一氧化氮合酶(N0s)的重要辅助因子，BH4的合成障碍会导致多种生理代谢疾病 或神经性代谢综合症。大量动物实验和临床研究证明，口服BH4对因BH4缺乏而导致的 疾病有明显的治疗效果。SP作为补救通路中合成BH4的底物，补充SP对某些疾病也有良 好的治疗效果。 -鲫蚕(』鲫鲫，』鲫)是家蚕的一种黄体色突变体，其体内由于缺乏sP还原酶而 使幼虫体表富含SP色素，是获取SP的宝贵生物资源。本研究以从-e!蜃体表分离纯化天 然SP，从而把提纯的SP进一步应用于BH4的体外合成为目标，对SP的提取纯化条件进 行筛选和优化，建立了一套行之有效的实验体系。 本实验采用溶剂浸提法从，鲫蚕体表提取sP，利用柱层析对sP进行分离纯化， 通过优化实验体系，获得了提取与纯化SP的最佳工艺条件。实验结果表明，在以50％ 纤维素柱为色素分离柱、以水一0．01％乙酸梯度洗脱分离柱，能够有效的将SP与其他 色素分开；以sephadex 纯化柱的流动相，取得了良好的纯化效果，经此实验体系获得的SP纯度较高。本实 验利用纸色谱法、紫外可见吸收光谱法和高效液相色谱法对SP进行了定性和定量分 析。 同时，利用高效液相色谱法对所提取的SP进行了定性定量分析。色谱条件为： 用oDS 方法操作灵敏度高、简便、准确、重复性好，可有效的对SP进行鉴定和分析。 目前市售的sP和BH4主要通过化工有机合成，价格十分昂贵。相比之下，本研 究所建立的实验体系具有成本低廉、工序简单、产量可观等明显优势。SP的提取量 可达46．8 Llg／g蚕体壁，研究成果为今后从I『鲫蚕体大规模工业化纯化回收天然SP， 进而通过体外合成的途径制备BH4的应用研究奠定了切实可行的理论基础。 关键词：．f锄墨蝶呤，四氢生物蝶呤，柱层析，HPLC Abstract akindof tothederivativeof Sepiapterin(SP)is yelIowpterinpigment，belongs studiesshowedthatSP an rolein pteridine．PreVious playsimponant cellmetabolism many andisoneof tofo咖insectcolor．Inthemetabolic processes endogenous pigments body of isan GTP，sP intennediatet0 pathway productsynthesize crucial for aromaticaminoacid andnitric．oxide coenzyme hydroxylases synthase． Disorder of and ofBH4would synthesisregeneration cause’some and neurological physiologic：al animal andclinicalresearches tha