昆虫病原线虫发相关基因的鉴定以及spi-583基因的克隆与表达.pdf

摘要 斯氏属 龇加Em绷口 与异小杆属 ^沱把m施曲讲出 昆虫病原线虫 Nematode 是国际上新型的生物杀虫剂，其感染期幼虫在食物信 Entomopatllogenic 息的诱导下恢复、发育以及大量繁殖，在这类线虫的产业化培养中发挥着重要作用。 了解线虫在恢复发育过程中差异表达的基因对探讨其代谢途径具有十分重要的意义。 A24在共生细菌 本论文通过构建无菌小卷蛾斯氏线虫B觑洲Ⅲ口c口rpDcE阳口P 上清液诱导后恢复发育时的cDNA文库，筛选差异表达的基因，并将其中一个与线 虫生长发育密切相关的丝氨酸蛋白酶抑制剂基因进行了原核表达。 A24 论文叙述了分离共生细菌上清液诱导后恢复发育的＆e觑绷绷口c口唧翻P阳e mediated cDNAEnd， 线虫总RNA，通过RLM．RACE m蛆li鼬seRapidAmplification 克隆，经测序和生物信息学分析获得34个DNA序列，这些序列按照蛋白质功能包 l—aIpha 、丝氨酸蛋白酶抑制剂 serine ● proteinase ． division ldn髂e protein 5 等。 以龇跏em硎口∞，pDc口脚e 印 霓?基因，将目的基因与pET-15b表达载体进行体外连接，构建了重组表达载体 稳定性；于重组菌的对数生长期前期加入诱导剂FrG 1mmol／L ，25℃下诱导表达 8h～12h后，获