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放射免疫技术 第一节　放射免疫技术 一、原理及分类 二、常用的放射性核素 三、标记物制备及鉴定 四、抗血清鉴定 第二节　放射免疫分析 一、基本原理 二、实验方法及测定 第三节 免疫放射分析 一、基本原理 二、IRMA与RIA的比较 标记免疫分析技术 用标记示踪技术观察抗原抗体一级反应的分析方法 特点：敏感性高，反应时间短，可用仪器检测结果 三大标记免疫分析技术：放射免疫、荧光免疫、酶免疫 检测方法 检测范围 生化、常规免疫 mg~μg（10-3 ~10-6 g） 荧光免疫、酶免疫 μg~ng（10-6 ~10-9 g） 放射免疫、发光免疫 ng~pg（10-9 ~10-12 g） PCR pg~fg（10-12 ~10-15 g） 概 述 1959年美国科学家Yalow和Berson开创。 优点：敏感性高、特异性强、重复性好、标本需要量小。 应用：内分泌学、免疫学、药物学、微生物学、生物化学等领域。 1977年获诺贝尔生物医学奖 罗莎琳·苏斯曼·雅洛(rosalyn Sussman Yalow) 1921年生于美国。在伊利诺斯大学取得博士学位。先在亨特女子学院工作，后来受聘于退伍军人管理局医院。由于开发了放射免疫分析法，可以定量测定末梢神经中的微量激素，1977年获诺贝尔生理学医学奖。 “如果你不是医生却在医院工作，那么，只要你抓住充分发挥自己专业特长的课题，你有可能获诺贝尔奖。” R．S．雅洛博士 1977年获生理学医学奖 雅洛１９２１年生于纽约。父母都是犹太人，她从小酷爱自然科学。在大学里，她热衷于物理学。居里夫人自传和核子物理学家美籍意大利人费米的讲演，对她后来的事业产生了很大的影响。她渴望从事科学研究工作。 罗莎琳对自己说：“犹太女人一定要当上科学家！”历尽艰难后，1941年，20岁的罗莎琳从亨特学院取得物理学与化学学士学位。这时，伊利诺斯大学的罗伯特·佩托恩教授破例收她当一名助教。这次老教授很赏识她的勇气和坚毅，让她管理一个光学实验室。 从１９４１年到１９４５年，她把主要精力都用在三项活动上：教学、钻研高深课题和准备核物理博士论文。她于１９４５年获得博士学位。从１９４５年起，她边授课，边研究，边著书立说，并在勃隆克斯医院筹备和开发新的放射性同位素应用工作。 1947年，当时的美国约有一千万糖尿病患者，其中绝大多数病人体内的胰岛素并不缺乏，属病因不明的“成年糖尿病人”。一位叫亚瑟默斯基的人提出了一个假说，他认为成年糖尿病人体内的胰岛素可能被肝脏内的胰岛素酶破坏了。 按照默斯基的假说，胰岛素在糖尿病人体内要比正常人消失得快，然而罗莎琳和伯桑观察到的事实与之相反，即糖尿病人体内较久地保持着标记的胰岛素。 又经过了多少次试验，1959年，罗莎琳和贝尔森第一次精确地测定出人体血浆的胰岛素浓度，证实了成年糖尿病人血浆中胰岛素并不缺少，只因与胰岛素抗体结合而丧失了降血糖的效能。　 此事一经传出，立即轰动了美国的医学界。从1972年至1976年，她先后荣获12项医学研究奖。1977年10月13日上午6点3刻，正当罗莎琳在实验室工作时，电话铃响了，传来了斯德哥尔摩的佳音，她荣获了这年的诺贝尔生理学及医学奖。 　　 雅洛与她的合作者贝尔森博士合作了２０年，共同创立了放射免疫检验方法。 放射免疫法包括两个方面的技术： 第一是生物学方面的。它利用特殊抗体的反应，甄别所给定的有机物质； 第二是物理学方面的。它将有放射性的原子引入有机物质中，给这些有机物质打上记号。 放射免疫法，是一种灵敏度高、较简便的测量法，几乎可测定生物体内任何物质，包括生物体本身分泌的各种激素，病人口服或注射的各种药物，一些病毒抗原等，已广泛用于生物常规检验。 基本原理 放射免疫分析的基本原理是标记抗原（Ag*）和非标记抗原（Ag）对特异性抗体（Ab）的竞争结合反应。它的反应式为： 放射性核素 一、标记物 标记用的核素有γ射线和β射线两大类。 γ射线主要为131I、125I、57Cr和60Co； 以125I最常用 检测仪： γ计数器 β射线有14C、3H 、32P。 以3H最常用 检测仪：液体闪烁计数器 基本试剂 （1）标准品