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色 谱 法 主要参考书 赵藻潘，仪器分析，高等教育出版社，1990年版。 陈复生等，精密分析仪器及应用，四川科学技术出版社，1989 主要内容 1.概述 2.色谱法原理 3.气相色谱法 4.液相色谱法 5.色谱的定性和定量分析 1.概述 色谱法（ Chromatography ） 与蒸馏、重结晶、溶剂萃取、化学沉淀及电解沉积法一样，也是一种分离技术 是各种分离技术中效率最高和应用最广的一种方法 色谱法从二十世纪初发明以来，经历了整整一个世纪的发展到今天已经成为最重要的分离分析科学 应用领域广泛，如石油化工、有机合成、生理生化、医药卫生、环境保护，农药残留检测、奥运会兴奋剂检测乃至空间探索等 色谱发展概况 1906年正式命名色谱法Chromatography) 创立人：俄国植物学家茨维特（Tswett） 应用吸附原理分离植物色素的新方法，碳酸钙作固定相,把植物根茎叶的石油醚提取液从柱顶端倒入，然后用纯净的石油醚冲洗，结果出现不同颜色的谱带，Tswett把这种分离方法命名为“色谱”。 Tiselius(1948年Nobel Chemistry Prize获得者)和Claesson,创立了液相色谱的迎头法和顶替法。 分配色谱是由著名的英国科学家马丁和辛格 (Martin和Synge)创立的，提出了塔板理论，并因此获得1952年的诺贝尔化学奖 1941年，马丁和辛格（Martin and Synge）用硅胶柱和氯仿-乙醇流动相首次成功分离了乙酰氨基酸，建立了液液色谱分析方法 色谱发展概况 1952年，马丁和詹姆斯（Martin and James）创建了气相色谱法，创立了气-液色谱法 ,气相色谱的出现使色谱技术从最初的定性分离手段进一步演化为具有分离功能的定量测定手段，极大的发展了色谱技术和理论 1956年，范第姆特（Van Deemter）总结了前人的经验,提出了反映载气流速和柱效关系的范第姆特方程式 1958年，戈雷（Golya）发明了分离效能极高的毛细管柱气相色谱法并建立了相关理论 1980年，Jorgenson等提出了高效毛细管电泳法，被迅速广泛应用于生命科学等各个领域，近年，毛细管电泳成为生物大分子的分离检测新途径。 色谱法分类 固定相 色谱法中，填入玻璃管中静止不动的一相（固体或液体）称为固定相 流动相 自上而下运动的一相（气体或液体）称为流动相 色谱柱 装有固定相的管子（玻璃或不锈钢）称为色谱柱。 色谱法种类很多，分类较复杂。 按流动相的物态分 气相色谱法--流动相为气体 按照固定相物态不同又分为气固色谱法（固定相为固态物质）、气液色谱（将不挥发性液体固定在固体载体上作为固定相） 液相色谱法—流动相为液体 按照固定相物态不同又分为液固色谱法（固定相为固态物质）、液液色谱（将固定液固定在固体载体上作为固定相） 按照产生分离过程的相系统的形式分类 柱色谱 填充柱色谱法：将很细的固定相装入玻璃管或金属管 毛细管色谱法：将固定相附着在一根细而长的管子内壁上 流动相依靠自身重力或外加压力通过固定相 平板色谱法 纸色谱法：固定相为多孔滤纸 薄层色谱：将吸附剂或载体均匀地铺在一块玻璃板或塑料板上, 流动相通过毛细现象或重力作用携带样品通过固定相 按照分离过程原理分类 吸附色谱 利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力强弱不同而得以分离的方法，称为吸附色谱法。 分配色谱 利用组分在固定液（固定相）中溶解度不同而达到分离的方法称为分配色谱法 凝胶色谱法---根据分子量大小不同而分离 亲和色谱法--利用不同组分与固定相（固定化分子）的高专属性亲和力进行分离的技术称为亲和色谱法，常用于蛋白质的分离。这是最近出现的一种新分离技术 按色谱技术分类 恒温色谱---柱温恒定不变 程序升温色谱---柱温在一个分析周期内不断变化升高。 裂解色谱---将高分子裂解为小分子气相色谱法。 顶空色谱---通过测定与液相或固相平衡的气体的组分，来判断液体或固体的组成。 毛细管柱色谱---用内径0.1mm-0.5mm的色谱柱 多维色谱---用两个或两个以上色谱柱。 制备色谱---制取纯样品、试剂等，一般色谱柱内径为8mm—20mm。 色谱法的特点 （一） 高选择性 色谱法能分离性质很相近的组分，如同位素、同分异构体、对映体等，选择性一般取决于选择合适的固定相。 （二） 高效能 填充柱都有几千块理论塔板;毛细管柱可达104块～105块理论塔板;毛细管电泳柱有几十万理论塔板的柱效。可以分离沸点十分相近的组分和极为复杂的多组分混合物。 色谱法的特点